小檗堿抗血管緊張素Ⅳ誘導(dǎo)的心肌肥大與PPAR-α-NO信號(hào)通路關(guān)系研究.pdf

1、目的:研究血管緊張素Ⅳ(AngiotensinⅣ,AngⅣ)誘導(dǎo)的心肌肥大模型中過氧化物酶體增殖物激活受體-α(Peroxisomeproliferator-activated receptor-α,PPAR-α)/一氧化氮(Nitric oxide,NO)信號(hào)通路的作用,并探討小檗堿(Berberine,BR)抗AngⅣ所致心肌肥大的可能機(jī)制。
　　 方法:利用AngⅣ建立心肌細(xì)胞肥大模型,以心肌細(xì)胞總蛋白含量、表面積和心房利

2、鈉因子(Atrial natriuretic factor,ANF)mRNA的表達(dá)作為心肌肥大的指標(biāo),觀察AngⅣ誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大的作用以及BR對(duì)該作用的影響。采用比色法、硝酸還原法、Real time RT-PCR和Westernblot法分別檢測(cè)一氧化氮合酶(Nitric oxide synthase,NOS)活性、NO濃度、以及mRNA和蛋白水平的表達(dá)。
　　 結(jié)果:AngⅣ(0.01nM、0.1nM、1nM)濃度依賴地增

3、加總蛋白含量、細(xì)胞表面積和ANF mRNA的表達(dá)(p＜0.01),促進(jìn)心肌細(xì)胞肥大;與此同時(shí),AngⅣ1nM下調(diào)內(nèi)皮型一氧化氮合酶(Endothelial nitricoxide synthase,eNOS)和PPAR-αmRNA的表達(dá)(P＜0.01),使PPAR-α蛋白的表達(dá)明顯減少(P＜0.01),NOS活性亦隨之降低,最后NO濃度減少(P＜0.01)。PPAR-α激動(dòng)劑非諾貝特(Fenofibrate,FF)顯著抑制AngⅣ所致心

4、肌細(xì)胞肥大作用,并增加PPAR-α和eNOS的mRNA水平的表達(dá)(P＜0.01),同時(shí)PPAR-α蛋白水平表達(dá)增加(P＜0.01),NOS活性升高,NO釋放增加(P＜0.01)。FF抗心肌肥大的作用則被PPAR-α阻斷劑MK886所阻斷(P＜0.01)。NO供體L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)也具有抗心肌肥大的作用,該作用與FF相似,并且此作用被NOS抑制劑NG-硝基-L-精氨酸-甲酯(NG-nitro-L-arginin

5、e-methyl ester,L-NAME)所阻斷(P＜0.01)。BR與FF和L-Arg類似,亦具有抗心肌肥大的作用,且呈濃度依賴陛地(10μM、30μM、100μM)抑制AngⅣ1nM所致心肌細(xì)胞肥大作用,亦使PPAR-α/NO信號(hào)通路激活(P＜0.01)。MK886和L-NAME均可阻斷BR的上述作用(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:AngⅣ所致心肌肥大的作用可能與PPAR-α/NO信號(hào)通路受損有關(guān);BR具有抗AngⅣ所致心