吳茱萸堿、鉤藤堿抑制血管緊張素Ⅱ誘導的心肌細胞肥大.pdf

1、目的：研究吳茱萸堿（evodiamine，Evo）、鉤藤堿（rhynchophylline，Rhy）對血管緊張素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）誘導心肌細胞肥大的抑制作用并探討其可能的作用機制。
　　 方法：利用原代培養(yǎng)的新生大鼠心肌細胞，測定細胞表面積、總蛋白質(zhì)含量和心房利鈉因子（atrial natriuretic factor，ANF）mRNA的表達，觀察Evo、Rhy抗心肌肥大的效應(yīng)。采用激光掃描共聚焦顯微鏡檢測

2、心肌細胞內(nèi)游離鈣（ntracellular freecalcium，[Ca2+]i）濃度，化學法測定細胞培養(yǎng)上清液一氧化氮（nitric oxide，NO）含量和一氧化氮合酶（nitric oxide synthetase，NOS）活性，Real time RT-PCR檢測心肌細胞鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶（calcineurin，CaN）、細胞外信號調(diào)節(jié)激酶2（extracellularsignal-regulated kinase2，ERK2）

3、和內(nèi)皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxidesynthase，eNOS）mRNA的表達，Western blot法檢測鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶a-亞基（CnA）和絲裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1（MKP-1）蛋白的表達，探討Evo、Rhy可能的作用機制。
　　 結(jié)果：AngⅡ0.1μM具有明顯的促心肌細胞肥大的作用，增加心肌細胞的表面積，蛋白質(zhì)含量和ANF mRNA的表達；并增加心肌[Ca2+]i濃度，降低NOS活性

4、和NO釋放，降低eNOS mRNA表達，增加CaN和ERK2 mRNA表達（P<0.05）。Evo（0.03-3μM）、Rhy（1-10μM）明顯抑制AngⅡ誘導的心肌細胞肥大，降低心肌[Ca2+]i濃度，增加NOS活性，促進NO釋放，上調(diào)eNOS mRNA表達，下調(diào)CaN、ERK2 mRNA表達；此外，Evo還能降低CnA蛋白表達而提高MKP-1蛋白表達。
　　 結(jié)論：Evo、Rhyn可抑制AngⅡ誘導的心肌細胞肥大，其作用機