黃芪苷Ⅳ對血管緊張素Ⅱ誘導新生大鼠心肌細胞肥大保護作用的研究.pdf

1、目的： 研究黃芪苷Ⅳ（AstragalosideⅣ，AST）對血管緊張素Ⅱ（AngiotensinⅡ，AngⅡ）誘導新生大鼠心肌細胞肥大的保護作用并探討其作用機制。 方法： 心肌細胞常規(guī)培養(yǎng)72 h，換無血清培養(yǎng)基同步化24 h后，分別加入不同藥物孵育72 h。實驗分6組：①正常對照組（Control）：DMEM-F12培養(yǎng)基；②模型組（AngⅡ）-AngⅡ10-7mol/L；③AST10組：AST10mg/L；

2、④AST20組：AST20mg/L；⑤AST10+AngⅡ組：同時加入AST10mg/L和AngⅡ10-7mol/L；⑥AST20+AngⅡ組：同時加入AST20mg/L和AngⅡ10-7mol/L。采用圖像分析系統(tǒng)測定細胞直徑大小；考馬斯亮藍法測定細胞總蛋白含量；pNPP酶法測定心肌細胞肌漿網(wǎng)鈣泵（Sarcoplasmic reticulum Ca2+-ATPases，SERCA）活力；Fura-2/AM標記，熒光分光光度計測定心肌細

3、胞內(nèi)[Ca2+]i；定磷法測定鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶（Calcineurin，CaN）活性。 結(jié)果： 1.細胞直徑：與Control組比較，AST10、AST20兩組細胞直徑的增加無統(tǒng)計學差異（P>0.05），AngⅡ組的細胞直徑顯著增加（16.1±1.1 vs11.1±1.0μm，P<0.01），AST10+AngⅡ組心肌細胞直徑增加（12.8±1.0 vs11.1±1.0μm，P<0.01）、AST20+AngⅡ組心肌細胞直

4、徑增加（12.4±0.9 vs11.1±1.0μm，P<0.01）；與AngⅡ組相比，AST10+AngⅡ組與AST20+AngⅡ組的細胞直徑分別減?。?2.8±1.0 vs16.1±1.1μm，P<0.01）、（12.4±0.9 vs16.1±1.1μm，P<0.01）。 2.細胞總蛋白含量：與Control組比較，AST10、AST20兩組的細胞總蛋白含量的增加無統(tǒng)計學差異（P>0.05），AngⅡ組的細胞總蛋白含量明顯增加

5、（146.3±25.2 vs95.9±20.5μg/well，P<0.01），AST10+AngⅡ組心肌細胞總蛋白含量增加T（121.1±23.6 vs95.9±20.5μg/well，P<0.05），AST20+AngⅡ組心肌細胞總蛋白含量的增加無統(tǒng)計學差異（P>0.05）；與AngⅡ組相比，AST10+AngⅡ組與AST20+AngⅡ組的細胞總蛋白含量分別減少（121.1±23.6 vs146.3±25.2μg/well，P<0.0

6、1）、（114.1±18.0 vs146.3±25.21μg/well，P<0.01）。內(nèi)[Ca2+]i的升高無統(tǒng)計學差異（P>0.05），AngⅡ組的[Ca2+]i顯著升高（283.9±40.7vs150.6±27.1 nmol/L，P<0.01），AST10+AngⅡ組的心肌細胞內(nèi)[Ca2+]i升高（204.8±33.9 vs150.6±27.1 nmol/L，P<0.01），AST20+AngⅡ組的心肌細胞內(nèi)[Ca2+]i升高（1

7、94.9±34.7 vs150.6±27.1 nmol/L，P<0.05）；與AngⅡ組相比，AST10+AngⅡ組與AST20+AngⅡ組的細胞內(nèi)[Ca2+]i分別降低（204.8±33.9 vs283.9±40.7nmol/L，P<0.00、（194.9±34.7 vs283.9±40.7 nmol/L，P<0.01）。 4.SERCA活力：與Control組比較，AST10、AST20兩組SERCA活力的降低無統(tǒng)計學差異（

8、P>0.05），AngⅡ組的SERCA活力顯著下降（0.83±0.20 vs2.07±0.45μmol/min·g pro，P<0.01），AST10+AngⅡ組心肌細胞SERCA活力下降（1.29±0.23 vs2.07±0.45μmol/min·g pro，P<0.01），AST20+AngⅡ組心肌細胞SERCA活力下降（1.42±0.37 vs2.07±0.45μmol/min·g pro，P<0.01）；與AngⅡ組相比，AST

9、10+AngⅡ組與AST20+AngⅡ組的SERCA活力均升高（1.29±0.23 vs0.83±0.20μmol/min·g pro，P<0.01）、（1.42±0.37 vs0.83±0.20μmol/min·g pro，P<0.01）。 5.CaN活性：與Control組比較，AST10、AST20兩組CaN活性的升高無統(tǒng)計學差異（P>0.05），AngⅡ組的CaN活性明顯增加（0.490±0.080 vs0.297±0.

10、072μmol/mg pro，P<0.01），AST10+AngⅡ組心肌細胞CaN活性升高（0.385±0.089 vs0.297±0.072μmol/mg pro，P<0.05），AST20+AngⅡ組心肌細胞CaN活性的升高無統(tǒng)計學差異（P>0.05）；與AngⅡ組相比，AST10+AngⅡ組與AST20+AngⅡ組的CaN活性分別升高（0.385±0.089 vs0.490±0.080μmol/mg pro，P<0.05）、（0.