黃芩素對IL-1β誘導的骨關節(jié)炎軟骨細胞NF-κB信號通路的影響.pdf

1、臨床上對于骨關節(jié)炎（Osteoarthritis，簡稱OA）患畜的治療方法主要側重于緩解癥狀。如臨床上多向患畜的關節(jié)腔內注射透明質酸等藥物;或使患畜服用解熱鎮(zhèn)痛藥“撲熱息痛”、非甾體類抗炎藥“NSAIDs”或“COX-2抑制劑”等藥物。這些方法雖然可以對OA的臨床癥狀起到緩解作用，但它們對患畜的機體均具有不同程度的副作用。OA的治療目的不應僅僅是改善癥狀，而還應達到消除和預防OA的目的。因此，有必要在治療研究的基礎上，應進一步闡明其發(fā)病

2、機制及藥物作用機理。近年來，許多實驗驗證的黃芩素(簡稱BAI)具有多種生物學活性，如抗炎、抗細胞凋亡等。本實驗利用IL-1β刺激大鼠軟骨細胞，誘導其產(chǎn)生OA模型，將BAI提取液==作用于該模型的軟骨細胞中，以探究在IL-1β誘導的大鼠OA中，BAI的干預對NF-κB信號通路及其基因產(chǎn)物表達的影響，為今后OA的臨床治療中BAI可作為快速有效的藥物而提供可靠的理論依據(jù)。
　　實驗對SD孕鼠產(chǎn)下的哺乳期幼鼠的軟骨細胞進行分離培養(yǎng)，取2代

3、細胞，首先用IL-1β(10ng/ml)進行預處理，24h后將IL-1β（10ng/ml）與（50μM）BAI共同作用于軟骨細胞中，分別處理0h、4h、8h、12h和24h。而后利用CCK-8試劑盒對于這些時間點的軟骨細胞進行檢測，探究BAI是否對軟骨細胞的活力產(chǎn)生影響;再利用蛋白免疫印跡法檢測軟骨細胞中基質金屬蛋白酶MMP-3、MMP-9，和化學因子COX-2的表達水平;及BAI對細胞質和細胞核內NF-κB p65和phospho-N

4、F-κBp65表達水平的影響。應用免疫熒光法檢測BAI對軟骨細胞NF-κB通路中p65核轉位的影響。
　　實驗結果表明不同濃度的BAI干預并沒有對軟骨細胞造成損傷。BAI能夠抑制由IL-1β誘導的OA軟骨細胞中MMP-3、MMP-9的表達，并調控了軟骨細胞中COX-2的表達下調;抑制細胞質中p65的磷酸化及核轉位。
　　綜上所述，本實驗通過對IL-1β誘導的OA軟骨細胞的研究，證實了BAI可以抑制OA軟骨細胞的凋亡，阻斷軟骨