脂肪來源干細胞(ADSCs)在周圍神經損傷修復中的研究.pdf

1、目的:采用酶預消化后連續(xù)組織塊法進行大鼠脂肪來源干細胞的體外培養(yǎng)，并與膠原酶消化法的培養(yǎng)效果相比較，研究脂肪來源干細胞的獲取途徑并為其體外增殖培養(yǎng)方法提供參考依據(jù)。
　　 方法:取一月齡SD大鼠腹股溝處脂肪組織，分A, B兩組。A組使用D-Hank's液沖洗凈后剪成g}3左右組織塊。將組織塊置于尼龍網上放至培養(yǎng)皿中，0.25％胰蛋白酶消化Smin, 0.1 ％I型膠原酶消化組織塊20min，棄去消化液體，加入培養(yǎng)基后放于孵化箱中

2、繼續(xù)培養(yǎng)。2-3天后將組織塊連同尼龍網一起拎除放至下一培養(yǎng)皿中以連續(xù)組織塊法培養(yǎng)3-4次。B組使用膠原酶消化法培養(yǎng)。采用MTT檢測方法對細胞增殖活性進行比較，流式細胞儀檢測脂肪干細胞表面標志物。
　　 結果:A,B兩組培養(yǎng)的細胞均具有典型的干細胞形態(tài)特征,生長曲線相近，脂肪干細胞標志物CD29,CD44, CD54, CD105呈陽性表達，造血干細胞標志物CD34, CD45陰性表達，骨髓來源干細胞標志物CD106陰性表達。A組