豬FcγRIIb介導(dǎo)PRRSV抗體依賴增強(qiáng)作用研究.pdf

1、豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的嚴(yán)重影響?zhàn)B豬業(yè)的最主要傳染病,給全世界養(yǎng)豬業(yè)帶來了重大損失。該病毒具有抗體依賴增強(qiáng)作用(ADE)、持續(xù)性感染、亞型多、臨床癥狀不明顯以及爆發(fā)突然等特點(diǎn),給臨床防控帶來很大困難?？贵w依賴增強(qiáng)作用(ADE)是指亞中和滴度的特異性抗體能夠增強(qiáng)病毒的復(fù)制和感染。ADE給疫苗的研發(fā)造成了重大障礙。
　　 ADE主要由免疫細(xì)胞表面的Fc受體(FcR)介導(dǎo)。Fc受體是

2、能與免疫球蛋白(Ig)的Fc段特異結(jié)合的一類細(xì)胞表面分子,通過與Ig Fc段相結(jié)合,參與機(jī)體多種免疫學(xué)效應(yīng)。豬IgG Fc受體主要可以分為FcvRⅠ(CD64)、FcyRⅡ(CD32)以及FcγRⅢ(CD16)三種。其中FcγRⅠ和FcγRⅢ的γ鏈含有ITAM基序,為活化型受體;FcγRⅡ因?yàn)榘麅?nèi)區(qū)所含有的相對(duì)保守的ITIM基序,屬于抑制型受體。關(guān)于登革熱病毒侵染人巨噬細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證明,活化型受體FcyRⅠ和FcyRⅡa可以介導(dǎo)ADE

3、作用,但抑制型Fc受體能否介導(dǎo)ADE尚未報(bào)道。本研究的目的在于探討豬FcγRⅡb作為一種抑制型受體,能否介導(dǎo)ADE作用。
　　 在前期已經(jīng)建立表達(dá)豬FcγRⅡb的Marc-145細(xì)胞系的基礎(chǔ)上,研究了細(xì)胞系表達(dá)Fc受體和復(fù)制PRRSV特性。RT-PCR和流式細(xì)胞術(shù)證明了轉(zhuǎn)染FcγRⅡb的Marc-145細(xì)胞系中FcγRⅡb可以穩(wěn)定表達(dá);在無PRRSV抗體存在的情況下PRRSV在轉(zhuǎn)染細(xì)胞系和未轉(zhuǎn)染細(xì)胞系中感染率、復(fù)制效率一致,但在

4、亞中和滴度抗PRRSV抗體存在的情況下,PRRSV感染后轉(zhuǎn)染細(xì)胞系子代病毒量顯著提高,野生型Marc-145細(xì)胞則無此效應(yīng)?？筆RRSV特異抗體的F(ab')2片段和PRRSV陰性豬血清均不能增強(qiáng)PRRSV感染。抗豬FcγRⅡ多抗能夠阻斷PRRSV抗體介導(dǎo)的增強(qiáng)作用。這些結(jié)果證明豬FcγRⅡb能夠特異介導(dǎo)PRRSV ADE作用。
　　 為進(jìn)一步研究抑制型IgG Fc受體介導(dǎo)ADE特性,研究了PRRSV ADE途徑和正常途徑感染表