豬FcγRⅢ介導(dǎo)PRRSV抗體依賴增強(qiáng)作用研究.pdf

1、IgG Fc受體(Fcγ receptors, FcγRs)可特異親和免疫球蛋白IgG(IgG,Immunoglobulin G) Fc片段，是非常重要的免疫細(xì)胞表面分子，在機(jī)體免疫防御中有很重要的作用，是細(xì)胞免疫和體液免疫的橋梁。研究發(fā)現(xiàn)FcγRs具有修復(fù)炎性損傷、吞噬作用、抗體依賴細(xì)胞毒作用、釋放炎性介質(zhì)和調(diào)節(jié)B細(xì)胞活性等功能，是哺乳動(dòng)物免疫應(yīng)答的重要組成部分。FcγRs是治療自身免疫性疾病、過敏、癌癥等免疫疾病理想的藥物靶標(biāo)。

2、r>　　 家畜FcγRs的研究比人與小鼠滯后，但近年來也有很大進(jìn)展，一些家畜FcγRs基因先后被克隆，生物學(xué)特性方面研究也取得進(jìn)步。豬IgG Fc受體由三類分子組成：FcγRⅠ(CD64)、FcγRⅡ(CD32)、FcγRⅢ(CD16)。其中FcγRⅢ(CD16)為50-80kDa的膜糖蛋白，在巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞和PMN細(xì)胞中都有表達(dá)，是唯一在NK細(xì)胞上表達(dá)的Fc受體。FcγRⅢ有兩個(gè)Ig樣胞外區(qū)結(jié)構(gòu)域，是中低親和力受體。豬FcγRⅢ

3、A是首個(gè)克隆的家畜FcγRⅢ基因，在多形核細(xì)胞(PMN,polymorphonuclear)中為45kDa糖蛋白，其胞內(nèi)區(qū)與FcRγ鏈或其它亞基相連，只有通過共轉(zhuǎn)染FcRγ鏈，才能在細(xì)胞表面表達(dá)FcγRⅢA。
　　 豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的以母豬流產(chǎn)和仔豬呼吸障礙為主要特征的傳染病，是困擾中國和世界養(yǎng)豬業(yè)的主要傳染病。PRRSV具有抗體依賴性增強(qiáng)作用(ADE)、病毒容易變異、存

4、在持續(xù)感染性及免疫抑制等免疫特性，其中ADE是困擾PRRS防控的最主要問題。目前有關(guān)PRRS ADE的分子機(jī)制研究較少。
　　 ADE主要由Fc受體介導(dǎo)，為研究豬FcγRⅢ在介導(dǎo)PRRS ADE中的作用，本研究構(gòu)建了豬FcγRⅢ和FcRγ鏈基因真核表達(dá)質(zhì)粒，共轉(zhuǎn)染Marc-145細(xì)胞，通過潮霉素B和G418連續(xù)雙抗性篩選和克隆獲得一株穩(wěn)定表達(dá)豬FcγRⅢ的Marc-145細(xì)胞系。用PRRSV BJ-4株與1600倍稀釋的抗PRR