抗炎藥物Actemra,AAT,CVF對轉(zhuǎn)基因豬到狒狒異種移植受體血清中主要炎癥因子的影響.pdf

1、目的:觀察抗炎藥物托珠單抗(Actemra),眼睛蛇毒因子(CVF),α1抗胰蛋白酶(AAT)應(yīng)用在轉(zhuǎn)基因豬主動脈片移植到狒狒后對狒狒血清中IFN-γ、IL-17、TNF-α及CRP等主要炎癥因子的影響，為在異種移植中聯(lián)合使用抗炎藥物來延長異種移植物的存活時間提供實驗依據(jù)。
　　方法：①將兩類轉(zhuǎn)基因豬（1.GTKO/hCD46/hERCP和2.GTKO/hCD46）的主動脈片移植到狒狒中，受者狒狒常規(guī)接受免疫抑制治療，用流式細胞儀

2、檢測供豬動脈內(nèi)皮細胞轉(zhuǎn)基因蛋白表達情況。②成功接受移植的狒狒分為4組，并給予相應(yīng)處理：a組：GTKO/hCD46/hERCP組，不使用抗炎藥物；b組：GTKO/hCD46+Actemra組，-1d，7d、14d、21d分別應(yīng)用Actemra10mg/kg,iv；c組：GTKO/hCD46+ATT組，0d、4d、7d、11d、14d分別用ATT60mg/kg,iv；d組：GTKO/hCD46+CVF組,-1d，7d、14d分別應(yīng)用CVF1

3、00IU，iv。③移植術(shù)前3d、術(shù)后及30d處安樂死前分別抽取狒狒外周血，分離血清，LEGENDplex Luminex試劑盒檢測血清IFN-γ,IL-17,TNF-α,IL-1，MCP-1,IL-8，IL-6及CRP的表達。
　　結(jié)果：①接受GTKO/hCD46/hERCP轉(zhuǎn)基因豬動脈片的狒狒血清中有高水平的 CD46、hEPCR表達。接受GTKO/hCD46轉(zhuǎn)基因豬動脈片的狒狒血清中有高水平的 CD46表達。②血清CRP濃度：

4、在a、c、d組中，由術(shù)前0.5mg/dl在術(shù)后3d內(nèi)升至2mg/dl,后下降至1.5mg/dl保持至安樂死。③血清IFN-γ濃度：在a、b、c、d組中基本與術(shù)前相同，小于20pg/ml。④血清IL-6濃度:在b、c、d組中與術(shù)前比未見明顯升高，小于50pg/ml;但a組中7d內(nèi)迅速升高，由術(shù)前100pg/ml升至400mg/dl，后緩慢下降，30d為250mg/dl。⑤血清TNF-α濃度：在a、b、c、d組中無明顯升高，術(shù)后保持10pg

5、/ml。⑥血清IL-17濃度：在a、c、d組中與術(shù)前基本一致，在b組中3d內(nèi)由術(shù)前的25pg/ml升至160pg/ml后迅速下降至術(shù)前濃度。⑦血清IL-8濃度：在a、c、d組中,由術(shù)前的5000pg/ml7d內(nèi)先降至4000pg/ml，14d升至10000pg/ml后緩慢下降，30d時為8000pg/ml；b組15d內(nèi)，由10000pg/ml緩慢升至15000pg/ml，后緩慢降至30d時為12000pg/ml。⑧血清IL-1濃度：在a

6、、c、d組中術(shù)前術(shù)后無變化，7pg/ml。⑨血清MCP-1濃度：在a、b組中，7d內(nèi)由2200pg/ml升至5500pg/ml，后緩慢降至最30d時為4000pg/ml。c、d組中，由術(shù)前2200pg/ml緩慢升至30d時為3000pg/ml。
　　結(jié)論：①單個使用 CVF對轉(zhuǎn)基因豬動脈片在異種移植給狒狒中炎癥因子表達有一定抑制作用，但都不能完全的阻止異種移植中主要炎癥因子的表達?？赡苄枰喾N抗炎機制藥物聯(lián)合使用來延長異種移植物的