產(chǎn)胞外多糖菌株的篩選及胞外多糖性質(zhì)和結(jié)構(gòu)分析.pdf

1、多糖具有降血糖、降血脂、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化等諸多優(yōu)良的生物活性，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、化妝品等領(lǐng)域，其中微生物胞外多糖具有產(chǎn)生量大、生產(chǎn)周期短、成本相對(duì)較低等優(yōu)勢(shì)，是研究和應(yīng)用較多的一類多糖。篩選新的產(chǎn)胞外多糖菌株和具有良好理化性質(zhì)的胞外多糖具有很大的意義。本研究從土壤樣品中篩選出一株產(chǎn)胞外多糖的菌株WL113,并對(duì)其產(chǎn)生的胞外多糖的性質(zhì)、結(jié)構(gòu)等作了初步的分析研究。
　　通過(guò)形態(tài)特征觀察及16S rDNA序列鑒定篩選出的產(chǎn)糖

2、菌株WL113是一種腸桿菌，命名為Enterobacter sp.WL113。向發(fā)酵2d的發(fā)酵液中加入2-3倍體積95％乙醇提取胞外多糖獲得粗多糖，粗多糖中總糖含量為68.33％，蛋白質(zhì)含量為12.91％。粗多糖經(jīng)純化后通過(guò)高效液相色譜、紅外光譜和核磁共振進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析表明，此多糖主要由6.46％甘露糖，18.20％葡萄糖，30.90％半乳糖，42.96％巖藻糖，1.47％葡萄糖醛酸組成，摩爾比為0.36∶1.00∶1.70∶2.36∶0

3、.08,分子為吡喃糖環(huán)，存在α型和β型吡喃糖苷鍵，分子中存在糖醛酸，是一種酸性雜多糖。
　　通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)優(yōu)化菌株產(chǎn)糖條件，得到最適合菌株產(chǎn)糖的碳源為蔗糖，氮源為酵母粉，且在蔗糖濃度范圍為10-30g/L、酵母粉濃度為1-3g/L時(shí)，胞外多糖產(chǎn)量逐漸增加，碳氮比為15∶1時(shí)，產(chǎn)糖量最高;最適培養(yǎng)溫度30℃，pH8.0，裝液量20mL/100mL(20％)。菌株在最適條件下培養(yǎng)后，胞外多糖產(chǎn)量提高至7.67g/L。
　　流變特

4、性研究表明，胞外多糖溶液粘度隨質(zhì)量濃度升高而增大，濃度為10g/L時(shí)粘度比1g/L時(shí)提高約33倍;對(duì)溫度敏感，隨著溫度升高，粘度下降明顯，100℃時(shí)粘度比25℃時(shí)降低了89.8％;在酸性、中性和弱堿性條件下粘度相對(duì)穩(wěn)定，pH10以上時(shí)粘度下降很快;對(duì)Na+、K+、Mg2+和Ca2+等金屬鹽離子耐受性能良好，F(xiàn)e3+會(huì)導(dǎo)致多糖沉淀。長(zhǎng)時(shí)間高溫加熱及強(qiáng)堿均可能會(huì)破壞多糖結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致粘度降低且不能恢復(fù)。
　　該多糖具有抗氧化能力，能夠清除

5、·OH自由基和H2O2,其吸濕保濕性能與被廣泛用作化妝品添加劑的透明質(zhì)酸類似，并有良好的絮凝能力，在多糖濃度為0.8g/L時(shí)，絮凝率在80％以上，在加入3g/L的CaCl2作助凝劑和pH6.0的條件下，絮凝率可提高至90％以上，具有開(kāi)發(fā)為生物絮凝劑的潛力。
　　Enterobacter sp.WL113具有培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單、培養(yǎng)周期短、產(chǎn)糖量較高等優(yōu)點(diǎn)，所產(chǎn)胞外多糖粘度大、易于提取分離、生物活性良好，在化妝品和環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域有開(kāi)發(fā)潛力