香菇胞外多糖高產(chǎn)菌株篩選、發(fā)酵條件優(yōu)化及抗氧化性抑菌作用的研究.pdf

1、香菇（Lentinula edodes）是一種深受人們喜愛(ài)的著名食藥用菌，其口感鮮美，而且含有豐富的活性多糖，具有抑制腫瘤、抗氧化、抑菌和增強(qiáng)人體免疫力等多方面的生理活性。本研究從16個(gè)野生及4個(gè)栽培香菇菌株中分離、篩選出一株高產(chǎn)胞外多糖的菌株，對(duì)高產(chǎn)胞外多糖的發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化，并對(duì)其抗氧化性及其抑菌活性等方面進(jìn)行了初步研究，旨在為香菇胞外多糖的抗氧化性和抑菌性研究提供思路和方法，同時(shí)也為香菇多糖作為抗氧化劑和抑菌成分的開(kāi)發(fā)利用提供理論

2、依據(jù)。主要研究結(jié)果和結(jié)論如下:
　　本研究對(duì)20個(gè)香菇菌株進(jìn)行產(chǎn)胞外多糖量等指標(biāo)比較，依據(jù)菌絲生長(zhǎng)速度、菌絲致密度、液體搖瓶菌球的干重、密度、大小以及胞外多糖產(chǎn)量等生物學(xué)性狀進(jìn)行初步篩選。在此基礎(chǔ)上，篩選出性狀較優(yōu)良菌株Le06、Le10、Le16和Le19。并對(duì)這4株菌株胞外多糖產(chǎn)量的穩(wěn)定性進(jìn)行分析比較。最終篩選出了具有菌球生物量大、胞外多糖產(chǎn)量高和產(chǎn)糖穩(wěn)定的香菇菌株Le10，該菌株的生物量和產(chǎn)胞外多糖量達(dá)到0.98 mg/mL

3、和0.78 mg/mL。
　　同時(shí)研究了不同發(fā)酵條件對(duì)香菇深層發(fā)酵的影響。結(jié)果表明在恒溫25℃、初始pH5.5、接種量10％、250mL的搖瓶裝液量100 mL的條件下培養(yǎng)，香菇深層發(fā)酵的菌絲體生物量及胞外多糖產(chǎn)量達(dá)到最大。同時(shí)考察了不同的碳、氮源及無(wú)機(jī)鹽離子對(duì)香菇深層發(fā)酵的影響，選取葡萄糖、黃豆粉為適宜的碳、氮源，KH2PO4和MgSO4·7H2O為最佳無(wú)機(jī)鹽離子。正交實(shí)驗(yàn)確定了香菇液體發(fā)酵的最佳培養(yǎng)基組成為:葡萄糖2％，黃豆粉

4、2％，KH2PO40.1％，MgSO4·7H2O0.025％，按照上述分析得到的最佳培養(yǎng)基組合進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果得到菌絲體生物量為1.32 mg/mL，比優(yōu)化前提高了34.69％;菌株胞外多糖產(chǎn)量為1.02 mg/mL，比優(yōu)化前提高了30.77％。
　　采用抗DPPH自由基能力測(cè)試、對(duì)羥自由基清除作用以及對(duì)超氧陰離子自由基清除作用等3種方法對(duì)香菇胞外多糖抗氧化能力進(jìn)行評(píng)價(jià)，香菇胞外多糖的濃度為0.30mg/mL時(shí)，其對(duì)DDPH自由基清

5、除率達(dá)到67.42％，對(duì)羥自由基的清除率達(dá)到75.49％;香菇胞外多糖在濃度0.25mg/mL下，對(duì)羥自由基的清除率達(dá)到最大，為68.12％，試驗(yàn)結(jié)果顯示香菇胞外多糖具有較好的抗氧化能力。此外，對(duì)香菇胞外多糖的抑菌活性及其抑菌穩(wěn)定性進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，香菇胞外多糖在pH為5-9條件下，都具有抑菌活性，其中在pH為6時(shí)抑菌活性最強(qiáng)，說(shuō)明該菌株具有較廣的酸堿抑菌譜。同時(shí)該香菇胞外多糖具有良好的熱穩(wěn)定性，即使在121℃下處理30min仍具有