

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、第一部分.大麻素受體信號對大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞誘發(fā)動作電位的作用
內(nèi)源性大麻素受體信號系統(tǒng)參與調(diào)控多種生理過程,包括攝食、體重控制、免疫、學(xué)習(xí)與記憶、鎮(zhèn)痛、運動控制等。目前已發(fā)現(xiàn)的大麻素受體有兩種:CB1和CB2,CB1主要表達在神經(jīng)系統(tǒng),而CB2主要存在于免疫系統(tǒng)。近年的研究發(fā)現(xiàn),內(nèi)源性大麻素可以作為逆向信號,通過激活突觸前的大麻素CB1受體調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)釋放。已有的研究表明,視網(wǎng)膜組織也存在有一套完整的內(nèi)源性大麻素系統(tǒng),但研
2、究主要集中在激活大麻素CB1受體對視網(wǎng)膜神經(jīng)元鉀通道和鈣通道的調(diào)控。盡管大麻素CB1受體在視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞上也有豐富的表達,但該信號系統(tǒng)對神經(jīng)節(jié)細胞的作用,尤其是對細胞興奮性的調(diào)控卻鮮有報道。因此,本實驗我們利用膜片鉗電流鉗技術(shù),在大鼠視網(wǎng)膜薄片上,研究了激活大麻素受體對大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞誘發(fā)動作電位的影響。
我們用注入電流和注入染料法來區(qū)分ON,OFF亞型的神經(jīng)節(jié)細胞,但在后續(xù)的實驗中發(fā)現(xiàn),這兩類細胞的實驗結(jié)果沒有明顯的區(qū)
3、別。盡管如此,我們?nèi)匀昏b定了細胞的ON和OFF亞型。我們首先研究了突觸輸入對大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞自發(fā)動作電位發(fā)放的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),神經(jīng)節(jié)細胞表現(xiàn)出規(guī)律性的自發(fā)動作電位發(fā)放,在灌流液中加入突觸傳遞阻斷劑(包括興奮性的谷氨酸受體阻斷劑CNQX和D-APV,抑制性的GABAA和甘氨酸受體阻斷劑bicuculline和strychnine)后,大部分細胞的自發(fā)動作電位發(fā)放逐漸減少,最后消失,說明大鼠神經(jīng)節(jié)細胞的自發(fā)動作電位發(fā)放依賴于突觸輸入。然
4、后,我們在阻斷突觸輸入的情況下,研究了大麻素受體激動劑WIN55212-2對電流注入(從+10 pA到+100 pA)誘發(fā)的神經(jīng)節(jié)細胞動作電位的影響。結(jié)果表明,+10 pA的注入電流并不能使所有細胞都誘發(fā)出動作電位,從+20 pA注入電流開始,動作電位的發(fā)放頻率逐漸增加(從5.8±1.9Hz到67.6±3.3 Hz,n=17),且放電頻率與注入電流呈線性關(guān)系,在灌流液中加入WIN55212-2(5μM)對動作電位的發(fā)放頻率沒有顯著影響(
5、從7.3±2.5 Hz到65.5±3.3 Hz,n=17,P值均>0.05)。同時,WIN55212-2對到達閾值所需電位、從注入電流到爆發(fā)第一個動作電位所需時間均沒有顯著影響。然而, WIN55212-2顯著抑制單個動作電位的最大上升速率(+dv/dt max)(對照組:185.5±16.6mV/ms到192.4±13.8 mV/ms, WIN55212-2:175.7±16.0 mV/ms到183.0±13.1mV/ms,n=17,
6、P<0.05到0.01),和最大下降速率(-dv/dt max)(對照組:-159.4±17.7 mV/ms到-163.5±13.0 mV/ms,WIN55212-2:-142.8±15.2 mV/ms到-149.3±11.1 mV/ms,n=17,P<0.05到0.001)。WIN55212-2對動作電位的作用可能與其調(diào)控參與動作電位形成的K+和Ca2+等離子通道有關(guān)。
這些結(jié)果證明,激活大鼠神經(jīng)節(jié)細胞的大麻素受體,可調(diào)控細
7、胞的某些離子通道,進而影響細胞的興奮性。詳細的機制還在進一步研究中。
第二部分.Kir和Ih通道對大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞自發(fā)放電的調(diào)控作用
神經(jīng)節(jié)細胞是視網(wǎng)膜的唯一輸出神經(jīng)元,它整合來自于雙極細胞的興奮性輸入和無長突細胞的抑制性輸入,其興奮性的改變直接影響視網(wǎng)膜的視覺信息輸出。內(nèi)向整流鉀通道(Kir)和超極化激活陽離子通道(Ih)與細胞的興奮性密切相關(guān),但它們在大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞上的表達、作用和調(diào)控機制尚存爭議。
8、r> 本研究利用電生理技術(shù),在離體視網(wǎng)膜薄片上,通過研究Kir和Ih通道對神經(jīng)節(jié)細胞自發(fā)放電的影響,分析Kir和Ih在維持神經(jīng)節(jié)細胞興奮性中的作用。
主要結(jié)果如下:(1)對于大部分的細胞,無論是ON型還是OFF型神經(jīng)節(jié)細胞,其自發(fā)動作電位均依賴于突觸輸入,有一小部分的細胞阻斷突觸輸入后放電依然存在且頻率顯著增強,這部分細胞可能是ipRGCs。興奮性突觸輸入增加自發(fā)放電頻率,減小脈沖間間隔,且使得放電模式變得更不規(guī)則。抑制性突
9、觸輸入減少大部分細胞的自發(fā)放電頻率,但有26%(6/23)的細胞自發(fā)放電頻率增加且脈沖間間隔減小;(2)無論是ON型還是OFF型神經(jīng)節(jié)細胞,阻斷Kir通道又能重新誘導(dǎo)出放電,脈沖間間隔減小,脈沖發(fā)放模式不變;(3)無論是ON型還是OFF型神經(jīng)節(jié)細胞,用非特異性阻斷劑Cs+阻斷Ih后均顯著提高自發(fā)放電頻率,且膜電位略有升高,脈沖間間隔無顯著變化,脈沖發(fā)放更不規(guī)則。用特異性阻斷劑ZD7288阻斷Ih后,細胞膜電位顯著降低,其中有71%(10
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- PMX205干預(yù)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞興奮性損傷的研究.pdf
- 大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞興奮性損傷過程中Mfn2作用的研究.pdf
- 褪黑素對大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的保護作用研究.pdf
- 小雞視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的雙峰反應(yīng).pdf
- 大鼠視網(wǎng)膜急性缺血損傷時視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞腦紅蛋白的表達.pdf
- 紅參對糖尿病大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的影響.pdf
- 視網(wǎng)膜前體細胞向視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞分化的實驗研究.pdf
- ?;撬釋Υ笫笠暰W(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞谷氨酸興奮毒性的防護及機制研究.pdf
- LEDGFp52對大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞作用研究.pdf
- 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞電活動的相關(guān)性分析.pdf
- Brn-3a標(biāo)記大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的實驗研究.pdf
- 牛蛙視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞編碼方式的研究.pdf
- 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞鋒電位分類方法.pdf
- aFGF及其改構(gòu)體對培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的影響.pdf
- 牛蛙視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的感受野特性.pdf
- 替普瑞酮大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷的保護作用.pdf
- 谷氨酰胺對大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷的保護作用.pdf
- 川芎對慢性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞凋亡的影響.pdf
- math5對大鼠視網(wǎng)膜m252;ller細胞源性干細胞向神經(jīng)節(jié)細胞轉(zhuǎn)化的調(diào)控作用
- 多巴胺能通路對牛蛙視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞群體放電活動的調(diào)控.pdf
評論
0/150
提交評論