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文檔簡介
1、目的:通過按不同摩爾比,用光化學(xué)交聯(lián)劑SANPAH將不同濃度鼠抗人CD34抗體接枝于經(jīng)過去細(xì)胞和光氧化后的牛頸靜脈(BJV)表面的初步研究,明確接枝鼠抗人CD34抗體的最佳濃度和與SANPAH的最佳反應(yīng)摩爾比,探討CD34抗體光化學(xué)偶聯(lián)法修飾去細(xì)胞光氧化牛頸靜脈基質(zhì)的方法。 方法:按4個(gè)不同摩爾比,SANPAH和4個(gè)不同濃度鼠抗人CD34抗體進(jìn)行反應(yīng)后,經(jīng)紫外線照射光化學(xué)接枝于經(jīng)過去細(xì)胞和光氧化后的BJV上,各組進(jìn)行快速冰凍切片
2、,滴加FITC標(biāo)記的羊抗鼠IgG,然后在熒光顯微鏡下照相,用Image-pro plus 5.0對圖像進(jìn)行分析,比較不同摩爾比和濃度反應(yīng)、結(jié)合的熒光效果,從而初步推斷出最佳反應(yīng)和結(jié)合的摩爾比和濃度。 結(jié)果:隨著鼠抗人CD34抗體濃度的升高,熒光累積光密度、平均光密度,整體上是越來越強(qiáng),但是當(dāng)濃度高于0.665×10-2mM時(shí),熒光差別不是很明顯;當(dāng)鼠抗人CD34抗體和SANPAH的反應(yīng)摩爾比為1:20時(shí),熒光最強(qiáng)。 結(jié)論
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