漆酶催化氧化17α-乙炔基雌二醇的實驗研究.pdf

1、環(huán)境激素是通過介入有機體內(nèi)激素的合成、分泌、體內(nèi)輸送、結(jié)合、作用或分解而影響有機體的穩(wěn)定性保持、生殖、發(fā)展或者行為的外來物質(zhì)，又可以稱為內(nèi)分泌干擾物質(zhì)或環(huán)境荷爾蒙。乙炔基雌二醇，簡稱EE2，是一種人工合成的環(huán)境激素，具有極強的內(nèi)分泌干擾性，極其微量的EE2便會對生物體造成嚴重的影響，有可能導致動物的雌雄同體現(xiàn)象，以及生殖器官異常等。
　　 本文建立了漆酶催化氧化17α-乙炔基雌二醇的反應體系，首先選取真菌漆酶進行催化氧化反應，通

2、過分光光度計和液相色譜儀進行分析，研究各實驗條件對漆酶催化氧化17α-乙炔基雌二醇的影響。主要完成了(1)建立漆酶催化氧化EE2的反應體系；(2)以ABTS為底物測定漆酶的活性以及其最適溫度和最適PH值。(3)研究各種反應條件，如PH值、溫度、酶量、EE2濃度等對漆酶催化氧化17α-乙炔基雌二醇的影響；(4)研究添加助催化劑ABTS對漆酶催化氧化17α-乙炔基雌二醇的影響；(5)研究磁力震蕩對漆酶催化氧化17α-乙炔基雌二醇的影響。本文

3、還選取了不同種類的漆酶對EE2進行催化氧化反應，分析其去除效果。
　　 實驗結(jié)果表明：以ABTS為底物測定真菌漆酶的最適溫度為35℃，最適PH值為3.93。在選取真菌漆酶進行催化氧化17α-乙炔基雌二醇的反應時，漆酶的最適PH值為5.38，最適溫度為35℃，酶量為0.75ml-2ml時，均有良好的EE2去除率，當EE2濃度為0.513mmol/L時，達到EE2最大去除量，反應體系在磁力振蕩時，有更好的去除率，在添加助催化劑ABT