牛結(jié)核病原學(xué)調(diào)查及結(jié)核分枝桿菌體內(nèi)誘導(dǎo)抗原研究.pdf

1、分類號 密級華 中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩 士學(xué)位論文牛結(jié)核病原學(xué)調(diào)查及結(jié)核分枝桿菌體 內(nèi)誘導(dǎo)抗原研 究P a th o g en icIn v estig a tio no fB o v in eTu b e rcu lo sisa n dId en tin ea tio no finVi v oIn d u ce dA n tig e nG en e so fM.Tu b erc u tosis研 究 生 : 鄧銼濤指 導(dǎo) 教 師 : 郭愛珍 教

2、授指 導(dǎo) 小 組 : 陳煥春 教授金梅林 教授何啟蓋 教授吳 斌 教授方六 榮 教授周 銳 教授肖少波 副教授劉 正飛 副教授專 業(yè) : 預(yù) 防獸 醫(yī)學(xué) 研 究 方 向: 動(dòng)物 傳 染病獲得 學(xué)位 名稱 : 農(nóng) 學(xué) 碩 士 獲 得 學(xué)位 時(shí) 間 : 2008 年 6 月華 中農(nóng) 業(yè) 大 學(xué)動(dòng)物 醫(yī)學(xué) 院二 0 0 八年 六 月一 一 一 一 一 一 一 型 塑 絕 鯉 蟹 竺 塑 匹 絲 __ ____ _二 _ .2. 2 . 4 寡

3、核普 酸 弓 } 物 · · · . · · · · . · · . . . · · . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

4、. . . . . . . . . . . . . . . . . . … … 252. 3 結(jié)核分枝桿菌 的臨床分離及分型鑒定 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … 262， 3.1 標(biāo) 本采集. . . .

5、83; . . … … ， . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … 262. 3. 2 標(biāo) 本 的前處理

6、83; · · · · · · · · · · ， · · … … 、 · · . · . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

7、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … 262. 3. 3 接種方法及結(jié)果判定. . . . . . . . . . . . … … ， 二 ， 二 、 二 ， . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … 272.

8、 3. 4 結(jié)核分枝桿菌的純化培養(yǎng) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … ， 二 ‘ . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … 272. 3. 5 結(jié)核分枝桿菌的保存 . ， . … ， . . . . . . . . . . . . . . . .

9、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … 272. 3. 6 分枝桿菌菌種 的生化 鑒 定 · · · · · · · · · ·

10、83; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

11、 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · …

12、… 272. 3. 7P C R 菌 株 分 型 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ， · · · 

13、3; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

14、· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

15、83; · · · … … 282.4 結(jié)核 分 枝 桿菌 基 因組 表 達(dá) 文庫 的構(gòu) 建 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · 

16、3; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

17、· · · · · · · · · … … 282. 4 . 1 結(jié) 核 分枝 桿 菌 H 37R v 的培 養(yǎng) 及基 因組 D N A 的提 取 · · · · · · · · · · · · · ·

18、83; · · · · · · · · · · … … 292. 4 . 2 結(jié) 核 桿菌 D N A 的酶切 及純 化 · · · ， · · · · ， · · · · · · · ·

19、· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

20、83; · · · · · · · · · · · · · · · · · … … 292. 4.3 質(zhì) 粒 的制 備 · · · · · · · · · · ·

21、; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · &

22、#183; · · · · · · · · · · · · · · · ， · · · · · · · ， · · · ， · · · 、 ·

23、83; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · … …302. 4.4 表達(dá)載體 pE T 30a 、pE T 30b 和 pE T 30c 的酶切 及 去磷 酸化

24、83; · · · · · · · · · · · · · … … 犯2. 4 . 5 目的基 因 與 表 達(dá) 載 體 的連 接 · · · · · · · · · · · · ·

25、 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · &#

26、183; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · … …332. 4.6 感 受態(tài) 細(xì) 胞 的制 備 (氯化鈣 法 ) · ·

27、; · · · · · · · · · · · · · · · · ， · · · · · · · · · · · · · · ·

28、 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · … …332. 4.7 質(zhì) 粒 的轉(zhuǎn) 化 . · ·

29、· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

30、83; · · · · · · · · ， · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · 

31、3; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

32、· … …332. 4 . 8 文 庫 鑒 定 與保 存 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · 

33、3; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

34、· · ， · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · &

35、#183; … …342.5 表達(dá) 文庫 的篩選 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

36、 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · &#

37、183; · · ， · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

38、83; · · · · · · · · · · · … … 342. 5.1 制備 用于篩選 的血清 · · · · · · · · · · · · · · · · &#

39、183; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ， · · · · · · · ， · · · &

40、#183; ， · · · · · · ， · · · · · ， · · · · · · · · · · · · · · · · · … … 342. 5.

41、2 文庫 的篩選 · · . · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

42、 · · · · · · · · · · · · · · · · · ， · · · · · · · · · · · · · ·

43、· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

44、83; · · · · … …352. 5. 3 陽性 克 隆重 組 質(zhì) 粒 的測序 及 分析 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

45、; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · &

46、#183; · · · · · ， 一 373 結(jié) 果 與 分 析 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

47、· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

48、83; · · · · · · · · · · · · · · · · ， · · · · · · · · · · · · · · 

49、3; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · …… 373. 1 結(jié)核 分枝桿菌 的臨床 分離及 分型鑒定結(jié)果 · · &#

50、183; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

51、; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · … …373.1. 1 結(jié) 核 分枝桿菌 的臨床 分離 · · · · · · · &

52、#183; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · 

53、3; · · · · · · · · · · · · · ， · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

54、; · · … …373.1. 2 牛 分 離菌株 的分 型 鑒 定· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · &

55、#183; · · · · · · · · · · · ， · · · · · · · · · · · · · · · · · · · &#

56、183; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · … … 383.1. 3 牛 源 人 型 結(jié) 核 菌 牛 群 的流 行 病 學(xué) 調(diào) 查 · · · ·

57、83; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ， · · · · · · · · · · 

58、3; · · · · · · · · · · · · · 一 393.1. 4 陽性 牛 撲 殺 結(jié) 果 · · · · · · · · · · · · · · 

59、3; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

60、· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·

61、83; · · · · · · · · · · · · ， … …393.1. 5 醫(yī) 院 臨床 分 離 菌 株 的分 型 鑒 定 結(jié) 果 · · · · · · · · · · · · ·

62、 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ， · · · · · · · · ·

63、· · · · · ， · · · · · … … 413. 2 結(jié) 核 分 枝 桿 菌 體 內(nèi)誘 導(dǎo)抗 原篩 選 結(jié) 果 · · · · · · · · · · · · · · ·

64、83; · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·