安胎丸的質(zhì)量控制及物質(zhì)基礎(chǔ)研究.pdf

1、安胎丸為古代經(jīng)典方劑，最早來源于《金匱要略》當(dāng)歸散一方。是由當(dāng)歸、制川芎、黃芩、炒白芍及白術(shù)五味藥材加工制成的中藥復(fù)方制劑，有安胎之功效，用于妊娠血虛，胎動(dòng)不安，面色淡黃，不思飲食，神疲乏力等病癥?，F(xiàn)收載于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)《中藥成方制劑》第一冊。現(xiàn)有安胎丸的質(zhì)量評(píng)價(jià)，標(biāo)準(zhǔn)及文獻(xiàn)報(bào)道了顯微鑒別、薄層色譜鑒別及幾個(gè)指標(biāo)性成分的定量測定。中藥及其復(fù)方具有多組分、多靶點(diǎn)、整體調(diào)節(jié)的特點(diǎn)，現(xiàn)有質(zhì)量評(píng)價(jià)方法難以控制安胎丸的整體質(zhì)量。本研究以血清藥物化

2、學(xué)作為中藥物質(zhì)基礎(chǔ)的研究方法，采用指紋圖譜技術(shù)結(jié)合多指標(biāo)成分定量分析對安胎丸的內(nèi)在質(zhì)量進(jìn)行研究，可為安胎丸的整體質(zhì)量控制提供依據(jù)。研究內(nèi)容如下：
　　一、基于UPLC-Q-TOF-MS技術(shù)的安胎丸化學(xué)成分研究
　　采用超高效液相色譜串聯(lián)四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF-MS）快速鑒定安胎丸的化學(xué)成分。色譜柱為Agilent Eclipse Plus-C18（50 mm×2.1mm，1.8μm）；以乙腈-0.1％甲酸水

3、溶液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，電噴霧離子源，正、負(fù)離子模式下采集數(shù)據(jù)。從安胎丸中共鑒定出59個(gè)化學(xué)成分，包括5個(gè)酚酸類成分、6個(gè)單萜苷類成分、29個(gè)黃酮類成分、14個(gè)苯酞類成分、2個(gè)苯乙醇苷類成分及3個(gè)倍半萜內(nèi)酯類成分，并對其裂解規(guī)律進(jìn)行解析。該研究為安胎丸的質(zhì)量控制和體內(nèi)代謝研究奠定了基礎(chǔ)。
　　二、安胎丸UPLC指紋圖譜及模式識(shí)別研究
　　建立安胎丸的超高效液相指紋圖譜分析方法，為評(píng)價(jià)其質(zhì)量提供依據(jù)。采用UPLC法，色譜柱為

4、Agilent SB-C18（100 mm×2.1 mm，1.8μm）；以乙腈-0.4%磷酸水溶液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，體積流量0.3 mL·min-1；0~2 min檢測波長為280 nm，2~8 min檢測波長為230 nm，8~9.4 min檢測波長為316 nm，9.4~35 min檢測波長為280 nm；柱溫35℃；進(jìn)樣量2μL。通過相似度評(píng)價(jià)，結(jié)合聚類分析（CA）、主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘判別分析（OPLS-DA

5、）對12批次安胎丸指紋圖譜進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)。標(biāo)定了安胎丸UPLC指紋圖譜的24個(gè)共有峰，指認(rèn)了9個(gè)成分：芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、阿魏酸、黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素、洋川芎內(nèi)酯A、白術(shù)內(nèi)酯I；12批樣品相似度均在0.9以上。通過主成分分析、聚類分析及正交偏最小二乘判別分析，12批樣品聚成3類，并發(fā)現(xiàn)阿魏酸、黃芩素等差異較大的5個(gè)成分。該法快速、高效、可靠，是安胎丸質(zhì)量控制的有效手段。
　　三、UPLC同時(shí)測定安胎丸中8種成分的含量<

6、br>　　建立同時(shí)測定安胎丸中8種成分（芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷、阿魏酸、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素、洋川芎內(nèi)酯A、白術(shù)內(nèi)酯I）含量的超高效液相色譜（UPLC）方法。采用Agilent SB-C18（100 mm×2.1 mm，1.8μm）色譜柱；以乙腈-0.4%磷酸水溶液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，體積流量0.3 mL·min-1；0~2 min檢測波長為280 nm，2~8 min檢測波長為230 nm，8~9.4 min檢測波長為316 nm

7、，9.4~35 min檢測波長為280 nm；柱溫35℃；進(jìn)樣量2μL。8個(gè)成分的峰面積與濃度的線性關(guān)系良好（r2≥0.9980）；回收率在98.0%~103.8%范圍內(nèi)。該方法快速、準(zhǔn)確、靈敏度高、重復(fù)性好，可用于安胎丸的質(zhì)量控制。
　　四、基于UPLC-Q-TOF-MS技術(shù)的安胎丸血中移行成分研究
　　采用UPLC-Q-TOF-MS技術(shù)分析安胎丸血中移行成分，以確定安胎丸體內(nèi)直接作用物質(zhì)。色譜柱為Agilent Ecli