安胎丸的質量控制及物質基礎研究.pdf

1、安胎丸為古代經(jīng)典方劑，最早來源于《金匱要略》當歸散一方。是由當歸、制川芎、黃芩、炒白芍及白術五味藥材加工制成的中藥復方制劑，有安胎之功效，用于妊娠血虛，胎動不安，面色淡黃，不思飲食，神疲乏力等病癥?，F(xiàn)收載于衛(wèi)生部藥品標準《中藥成方制劑》第一冊。現(xiàn)有安胎丸的質量評價，標準及文獻報道了顯微鑒別、薄層色譜鑒別及幾個指標性成分的定量測定。中藥及其復方具有多組分、多靶點、整體調節(jié)的特點，現(xiàn)有質量評價方法難以控制安胎丸的整體質量。本研究以血清藥物化

2、學作為中藥物質基礎的研究方法，采用指紋圖譜技術結合多指標成分定量分析對安胎丸的內在質量進行研究，可為安胎丸的整體質量控制提供依據(jù)。研究內容如下：
　　一、基于UPLC-Q-TOF-MS技術的安胎丸化學成分研究
　　采用超高效液相色譜串聯(lián)四級桿飛行時間質譜（UPLC-Q-TOF-MS）快速鑒定安胎丸的化學成分。色譜柱為Agilent Eclipse Plus-C18（50 mm×2.1mm，1.8μm）；以乙腈-0.1％甲酸水

3、溶液為流動相進行梯度洗脫，電噴霧離子源，正、負離子模式下采集數(shù)據(jù)。從安胎丸中共鑒定出59個化學成分，包括5個酚酸類成分、6個單萜苷類成分、29個黃酮類成分、14個苯酞類成分、2個苯乙醇苷類成分及3個倍半萜內酯類成分，并對其裂解規(guī)律進行解析。該研究為安胎丸的質量控制和體內代謝研究奠定了基礎。
　　二、安胎丸UPLC指紋圖譜及模式識別研究
　　建立安胎丸的超高效液相指紋圖譜分析方法，為評價其質量提供依據(jù)。采用UPLC法，色譜柱為

4、Agilent SB-C18（100 mm×2.1 mm，1.8μm）；以乙腈-0.4%磷酸水溶液為流動相進行梯度洗脫，體積流量0.3 mL·min-1；0~2 min檢測波長為280 nm，2~8 min檢測波長為230 nm，8~9.4 min檢測波長為316 nm，9.4~35 min檢測波長為280 nm；柱溫35℃；進樣量2μL。通過相似度評價，結合聚類分析（CA）、主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘判別分析（OPLS-DA

5、）對12批次安胎丸指紋圖譜進行質量評價。標定了安胎丸UPLC指紋圖譜的24個共有峰，指認了9個成分：芍藥內酯苷、芍藥苷、阿魏酸、黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素、洋川芎內酯A、白術內酯I；12批樣品相似度均在0.9以上。通過主成分分析、聚類分析及正交偏最小二乘判別分析，12批樣品聚成3類，并發(fā)現(xiàn)阿魏酸、黃芩素等差異較大的5個成分。該法快速、高效、可靠，是安胎丸質量控制的有效手段。
　　三、UPLC同時測定安胎丸中8種成分的含量<

6、br>　　建立同時測定安胎丸中8種成分（芍藥內酯苷、芍藥苷、阿魏酸、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素、洋川芎內酯A、白術內酯I）含量的超高效液相色譜（UPLC）方法。采用Agilent SB-C18（100 mm×2.1 mm，1.8μm）色譜柱；以乙腈-0.4%磷酸水溶液為流動相進行梯度洗脫，體積流量0.3 mL·min-1；0~2 min檢測波長為280 nm，2~8 min檢測波長為230 nm，8~9.4 min檢測波長為316 nm

7、，9.4~35 min檢測波長為280 nm；柱溫35℃；進樣量2μL。8個成分的峰面積與濃度的線性關系良好（r2≥0.9980）；回收率在98.0%~103.8%范圍內。該方法快速、準確、靈敏度高、重復性好，可用于安胎丸的質量控制。
　　四、基于UPLC-Q-TOF-MS技術的安胎丸血中移行成分研究
　　采用UPLC-Q-TOF-MS技術分析安胎丸血中移行成分，以確定安胎丸體內直接作用物質。色譜柱為Agilent Ecli