墊狀卷柏提取物的制備工藝及物質(zhì)基礎(chǔ)研究.pdf

1、墊狀卷柏是民間傳統(tǒng)用藥，現(xiàn)代藥理學(xué)研究證明墊狀卷柏具有抗腫瘤、降血糖、抗菌抗病毒等多種藥理活性，15版《藥典》收載卷柏或墊狀卷柏為藥用品種。雙黃酮類化合物被認為是卷柏屬植物的主要藥效成分，其中穗花杉雙黃酮為墊狀卷柏提取物中含量較高的雙黃酮，具有降血糖、抗氧化、抗炎等多種生物學(xué)活性作用。本課題將以穗花杉雙黃酮含量為考察指標(biāo)，對提取方法、富集工藝進行優(yōu)化，并對富集后的墊狀卷柏提取物進行定性分析及活性評價，同時構(gòu)建卷柏藥材指紋圖譜，主要內(nèi)容如

2、下:
　　(1)在單因素實驗基礎(chǔ)上以乙醇濃度、加醇倍量、提取時間、提取次數(shù)設(shè)計響應(yīng)面，優(yōu)化醇提工藝。得到最優(yōu)提取條件:乙醇濃度71％、提取時間60min、提取次數(shù)3次、加醇倍量12倍，在此條件下，穗花杉雙黃酮提出量為17.28mg/g。以穗花杉雙黃酮含量為主要指標(biāo)，采用大孔樹脂和二次沉淀兩種簡單的方法富集墊狀卷柏粗提物，并優(yōu)化工藝參數(shù)。大孔樹脂最優(yōu)參數(shù):提取物濃度100mg/mL，上樣流速1.0mL/min，80％乙醇洗脫，洗脫流

3、速1.0mL/min，洗脫溶劑用量4倍柱體積，在此條件下提取物中穗花杉雙黃酮含量由原來的13.79％提高至52.46％;二次沉淀最優(yōu)參數(shù):乙醇濃度30％，水沉溫度5℃，攪拌速度400rpm，加水速度3mL/min，該條件下提取物中穗花杉雙黃酮含量提高至47.92％。大孔樹脂富集工藝更適用于墊狀卷柏提取物中穗花杉雙黃酮的富集。
　　(2)利用HPLC-MSn技術(shù)結(jié)合化合物碎片信息及文獻資料，對富集后墊狀卷柏提取物進行定性鑒別，共鑒定

4、27個化合物，其中13個黃酮類成分、10個炔酚類成分以及4個其他類型的化合物，為有效地闡明墊狀卷柏提取物的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供參考價值。
　　(3)對富集后的墊狀卷柏提取物進行體外降糖活性和抗氧化活性試驗。結(jié)果表明墊狀卷柏提取物對α-葡萄糖苷酶具有較好的抑制作用，其IC50值分別為0.1978mg/mL(阿卡波糖的IC50值為2.6996mg/mL)。DPPH實驗表明墊狀卷柏提取物是一種慢速抗氧化劑，其IC50為184.8μg/mL(

5、VC的IC50值為12.84μg/mL)。
　　(4)對14批卷柏屬藥材進行含量測定并建立卷柏藥材指紋圖譜的共有模式，指定7個共有峰，其中卷柏藥材相似度均大于0.8，聚類分析和主成分分析均將樣品分為4類，其中2號峰（穗花杉雙黃酮）是卷柏藥材分類歸屬的關(guān)鍵成分，從產(chǎn)地分類歸屬看指紋圖譜技術(shù)結(jié)合化學(xué)計量學(xué)可為卷柏藥材的整體質(zhì)量評價提供科學(xué)依據(jù)。
　　本課題對墊狀卷柏提取物做了較為系統(tǒng)的研究，為其在工業(yè)生產(chǎn)、藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、藥品開發(fā)