關(guān)節(jié)腔注射“玻璃酸馬錢子總堿凝膠液”對實驗性大鼠KOA影響的研究.pdf

1、目的:
　　 通過觀察“玻璃酸馬錢子總堿凝膠液”對實驗性大鼠膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎(KOA)模型關(guān)節(jié)軟骨病理形態(tài)以及膝關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)液中基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)、白介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)的含量和軟骨中基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)mRNA表達(dá)的影響,初步探討玻璃酸馬錢子總堿凝膠液在防治KOA方面的療效與機制。
　　 方法:
　　 (1)以4％木瓜蛋白酶溶液膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射建立大鼠KOA模型,

2、取無造模的大鼠為正常組,造模后的大鼠分為生理鹽水組(NS)、溶媒組、玻璃酸鈉組(SH)及玻璃酸馬錢子總堿凝膠液高劑量組、玻璃酸馬錢子總堿凝膠液常用劑量組(以下簡稱:馬錢子總堿高劑量組、馬錢子總堿常用劑量組)。除正常組外,其它各造模組分別經(jīng)膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射生理鹽水注射液、溶媒注射液、玻璃酸鈉注射液、馬錢子總堿高劑量注射液及馬錢子總堿常用劑量注射液,每周干預(yù)1次,共5周后,取大鼠雙側(cè)膝關(guān)節(jié)進(jìn)行相關(guān)觀察檢測;
　　 (2)通過肉眼觀察關(guān)

3、節(jié)軟骨、滑膜大體形態(tài)改變,光鏡下觀察關(guān)節(jié)軟骨經(jīng)HE及AB-PAS染色后的病理形態(tài)改變;
　　 (3)分別用放免法和Elisa法檢測各組膝關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)液中MMP-1、IL-6、TNF-α的含量;
　　 (4)采用RT-PCR方法觀察玻璃酸馬錢子總堿凝膠液對大鼠KOA關(guān)節(jié)軟骨中MMP-13mRNA表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果:
　　 (1)膝關(guān)節(jié)大體形態(tài)方面:正常組大鼠的膝關(guān)節(jié)軟骨無退行性改變,滑膜也無炎性改變;NS

4、組與溶媒組大鼠的關(guān)節(jié)滑膜增生嚴(yán)重,關(guān)節(jié)腔內(nèi)積液明顯,關(guān)節(jié)軟骨呈灰白色,色澤晦暗,嚴(yán)重者軟骨表面出現(xiàn)裂紋、缺損,深達(dá)骨質(zhì),部分軟骨邊緣可見骨贅;SH組和馬錢子總堿高劑量組的大鼠關(guān)節(jié)滑膜中度增生,部分大鼠的關(guān)節(jié)腔內(nèi)有粘稠的積液,關(guān)節(jié)軟骨變薄、稍粗糙,表面明亮度不明顯,可見點狀凹陷;馬錢子總堿常用劑量組大鼠的滑膜輕度增生,少許積液,軟骨尚光滑,有散在的點狀凹陷。
　　 (2)關(guān)節(jié)軟骨病理形態(tài)方面:分析各組關(guān)節(jié)軟骨的組織學(xué)-組織化學(xué)分級

5、(HHGS)評分分?jǐn)?shù),造模2周后,模型組與正常組比較有顯著差異(p＜0.05),模型組明顯高于正常組。藥物干預(yù)周期結(jié)束后,馬錢子總堿高劑量組、馬錢子總堿常用劑量組、SH組與NS組、溶媒組比較亦有顯著差異(p＜0.05),前三者比后兩者明顯降低;馬錢子總堿常用劑量組與馬錢子總堿高劑量組和SH組對比也有顯著差異(p＜0.05),前者明顯低于后二者;而馬錢子總堿高劑量組與SH組相比無顯著差異(p＞0.05)。
　　 (3)膝關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)液

6、中MMP-1、IL-6、TNF-α含量方面:馬錢子總堿高劑量組、馬錢子總堿常用劑量組、SH組與NS組、溶媒組相比均有顯著差異(p＜0.05),前三者明顯低于后二者;馬錢子總堿常用劑量組與馬錢子總堿高劑量組、SH組對比也有明顯差異(p＜0.05),前者明顯低于后二者;馬錢子總堿高劑量組與SH組相比無顯著差異(p＞0.05)。
　　 (4)關(guān)節(jié)軟骨中MMP-13mRNA表達(dá)方面:馬錢子總堿高劑量組、馬錢子總堿常用劑量組、SH組與NS

7、組、溶媒組相比均有顯著差異(p＜0.05),前三者明顯低于后二者;馬錢子總堿常用劑量組與馬錢子總堿高劑量組、SH組對比也有顯著差異(p＜0.05),前者明顯低于后二者;馬錢子總堿高劑量組與SH組相比無顯著差異(p＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 (1)馬錢子總堿高劑量組、馬錢子總堿常用劑量組與SH組均能不同程度改善木瓜蛋白酶誘導(dǎo)的大鼠KOA關(guān)節(jié)軟骨的病理形態(tài),減輕關(guān)節(jié)軟骨的退變、損害及關(guān)節(jié)滑膜的炎癥反應(yīng),其中以馬錢子總