菲律賓蛤仔凝集素的制備及其在魚類保鮮中應用的研究.pdf

1、雙殼貝類同其它無脊椎動物一樣，體內(nèi)缺乏脊椎動物的抗原-抗體免疫系統(tǒng)，只能通過體液免疫來識別、抵抗及消除異物，而凝集素就是雙殼貝類免疫防御的主要參與者之一，因此具有多種生物活性。本研究以菲律賓蛤仔為材料，制備菲律賓蛤仔凝集素，研究其抑菌活性及在魚類保鮮中的應用，為菲律賓蛤仔凝集素提供基礎數(shù)據(jù)。
　　本研究采用硫酸銨沉淀法獲得菲律賓蛤仔凝集素粗品，然后分別經(jīng)Cellulose DE52離子交換層析和 Sephadex G-100凝膠過

2、濾層析及 DEAE-Sepharose CL-6B離子交換層析和Sephacryl S-200 HR凝膠過濾層析兩步分離純化菲律賓蛤仔凝集素。確定出最佳制備工藝為：粗提液先用飽和度為80％的硫酸銨鹽析得到粗品，然后經(jīng)DEAE-Sepharose CL-6B離子交換層析和Sephacryl S-200 HR凝膠過濾層析兩步純化，得到菲律賓蛤仔凝集素MCL。研究了MCL的抑菌活性，結果表明菲律賓蛤仔凝集素對腐敗希瓦氏菌表現(xiàn)出良好的抑制活性，

3、且其抑菌活性具有溫度依賴性。用掃描電子顯微鏡觀察 MCL作用于腐敗希瓦氏菌后，細菌表面的形態(tài)變化，觀察到經(jīng) MCL處理后希瓦氏菌細胞表面變褶皺且出現(xiàn)孔洞，且30℃條件下孔洞數(shù)量多于4℃。測定了經(jīng)MCL處理后希瓦氏菌細胞內(nèi)Ca2+含量的變化，與對照組相比，經(jīng)MCL處理的希瓦氏菌細胞內(nèi)Ca2+含量較低，可能是由于MCL與希瓦氏菌細胞膜作用，擾亂膜脂分子排列，改變了細胞膜的通透性，影響細胞膜的結構和功能，在細胞膜上形成孔道致使細胞內(nèi)離子如Ca