日本囊對蝦凝集素的分離及其功能研究.pdf_第1頁
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1、分類號——UDC廈門大學博士后研究工作報告密級編號——日本囊對蝦凝集素的分離及其功能研究楊海杰合作導師:徐洵教授李少菁教授工作完成時間:2003年1月2005年9月報告提交時間:2005年12月廈門大學海洋與環(huán)境學院2005年12月AbstractAbstractCrustaceansassumeaparticulareconomicimportanceasafoodsourceandtheiruseinaquaculture,espe

2、ciallypenaeidshrimps,iscurrentlyexpandingTheSHCCeSSofshrimpcultivationis,howeverseriouslyendangeredbydiseasesLectinshavebeenregardedasanimportantroleinnon—selfrecognizationandpathogenclearanceininvertebrateimmunityThisdi

3、ssertationaims砒isolatingandcharacterizingthelectinsinshrimpinordertohelpthepreventionoftheshrimpdiseasesByusingaffinitychromatographywithfetuinSepharose,anaturallectin(nominatedPjLec)wasisolatedfromthehemolymphoftheshrim

4、pMarsupenaeusjaponicusSDSPAGEshowedthatthepurifiedPjLecproteinconsistedof37kDasubunitsThenativePjLecbehavedasa452kDaproteiningelfiltrationchromatographywithSuperdex200ThosedatastronglysuggestthatPjLecisbuiltupby12subunit

5、sofsimilarmolecularweightPjLeccouldagglutinateallthemammalianerythrocytestested,andthehemagglutinationiscalciumindependentTheagglutinationactivitywasstablebetweenpH6andpH8,andwastemperature—dependentThehemagglutinationof

6、PjLecproteinwasinhibitedbyManNAc,Neu5Aandlipopolysaccharide(LPS)Bovinesubmaxillarymuein(BSM),whichcontainsmainlyNeu5A,isthemostpotentinhibitorofPjLec謝tllaMICofO0006medmLFurthermore,PjLechasabroadagglutinationactivityonGr

7、amnegativeandpositivebacteriaand4of5strainsofpathogeneticbacteriaofshrimp(Vibrioparahaemolyticus,Aeromomashydrophilic,VibrioalginolyticusandMicrococcuslysodeikticus)couldbeagglutinatedbyPjLeeItsuggestsPjLecmightplayanimp

8、ortantroleindefenseagainstbacterialinfectioninPenaeusjaponicusInpreviousstudies,weisolatedanovelCtypelikelectin(nominatedPjLec2)fromtheSSHlibraryofhepatopancreasinMarsupenaeusjaponicusTheexpressionlevelofPjLec2mRNAinviru

9、sresistantshrimpsisobviouslyhigherthanthatinnormalshrimpsInthisstudylectinPjLec2wasexpressedinEcoliandpartialfimctionofPjLec2wasanalyzedItcouldbehighlyexpressedinEcoliwhenfusedwithGSTHoweverhemagglutinationassayshowedtha

10、tpurifiedPjLee2waslackofhemagglutinatingactivitytoall7testedmammalRBCsincludingmouse,miceandrabbit,Inaddition,9721eccanagglutinatetwoGramnegativebacteriaAeromomashydrophilicandHbrioalginolyticusbothofwhicharemayorpathoge

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