大腸埃希菌毒力因子檢測及其與耐藥相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　 1．了解溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院臨床分離大腸埃希菌的耐藥情況及毒力因子的分布情況，探討大腸埃希菌表達(dá)的毒力因子及其耐藥性之間的關(guān)系。
　　 2．分析溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院臨床分離產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌的耐藥情況，研究大腸埃希菌超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的不同基因型與所含的毒力因子的關(guān)系，為指導(dǎo)臨床合理應(yīng)用抗菌藥物，提高抗菌藥物治療效率提供依據(jù)，也為ESBLs與毒力因子的相關(guān)性研究提供基礎(chǔ)。
　　 方法

2、：
　　 1．回顧性調(diào)查溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院臨床分離大腸埃希菌的臨床分布情況，VITEK60全自動微生物分析儀和K-B紙片擴(kuò)散法檢測大腸埃希菌對氨芐西林、環(huán)丙沙星、頭孢曲松、呋喃妥因、亞胺培南、復(fù)方新諾明、妥布霉素、頭孢吡肟、氨曲南、丁胺卡那、頭孢唑啉、慶大霉素、左旋氧氟沙星、頭孢他啶、頭孢哌酮/舒巴坦、氨芐西林/舒巴坦的耐藥性。
　　 2．PCR方法檢測不同標(biāo)本來源大腸埃希菌的毒力因子papC、sfa/foc、afa

3、/dra、iutA、aer、fimH、hly、cnfl、kpsMTⅡ、fyuA。
　　 3．紙片擴(kuò)散確證法檢測超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)，PCR方法檢測ESBLs不同基因型的分布情況。
　　 結(jié)果：
　　 1.188株大腸埃希菌中，毒力基因iutA、fyuA、aer的檢出率較高，分別為64.4％、60.6％和43.6％，imH的檢出率為22.9％，sfa/foc、afa/dra、papc、KpsMTⅡ的檢出

4、率較低，均小于20％，hly、cnfl未檢出。
　　 2．尿液標(biāo)本分離的大腸埃希菌中，毒力因子iutA、aer、fyuA、fimH的檢出率分別為64.1％、54.7％、71.9％和39.1％，而毒力因子papc、sfa/foc、afa/dra、KpsMTⅡ的檢出率均小于20％(分別為12.5％、6.3％、10.9％、1.6％)：血液標(biāo)本分離的大腸埃希菌中，毒力因子papc、iutA、aer、fyuA的檢出率分別為22.5％、67

5、.7％、21.0％和56.4％，而sfa/foc、afa/dra、KpsMTⅡ、fimH的檢出率均小于20％;膿液標(biāo)本分離的大腸埃希菌中，
　　 3.188株大腸埃希菌對氨芐西林的耐藥率最高，達(dá)到88.8％；對環(huán)丙沙星、左旋氧氟沙星、慶大霉素、妥布霉素、復(fù)方新諾明、頭孢類抗生素的耐藥率也較高，均大于40％;對氨曲南的耐藥率為36.2％；對呋喃妥因、亞胺培南、頭孢哌酮/舒巴坦、丁胺卡那霉素的耐藥率較低。
　　 4．氨芐西林

6、的耐藥性與毒力因子aer有關(guān)(P＜0.05)，喹諾酮類抗菌藥物環(huán)丙沙星、左旋氧氟沙星的耐藥性與毒力因子iutA有關(guān)，頭孢唑啉的耐藥性與afa/dra有關(guān)，慶大霉素的耐藥性與aer有關(guān)，復(fù)方新諾明的耐藥性與sfa/foc、iutA、aer有關(guān)，頭孢他啶的耐藥性與sfa/foc、iutA有關(guān)，氨芐西林/舒巴坦的耐藥性與aer有關(guān)(P＜0.05)。
　　 5．產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌的耐藥率明顯高于不產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌。其中產(chǎn)ESB

7、Ls大腸埃希菌氨芐西林耐藥率為100％;頭孢曲松、頭孢唑啉、頭孢他啶均在90％以上；復(fù)方新諾明82.6％；環(huán)丙沙星、左旋氧氟沙星79.3％；慶大霉素77.1％。非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對氨芐西林的耐藥率為70％;復(fù)方新諾明為58％。產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌與非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌對亞胺培南及頭孢吡肟、呋喃妥因耐藥性低。
　　 6．產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌株中，毒力因子iutA、fyuA的檢出率較高，均＞50％；毒力因子fimH、a

8、er的檢出率為20％～40％，而毒力因子papC、sfa/foc、afa/dra和kpsMTⅡ的檢出率均較低＜20％；經(jīng)x2檢驗產(chǎn)ESBLs菌株與非產(chǎn)ESBLs菌株的毒力因子分布率差異均無顯著性(P＞0.5)。
　　 7.188株大腸埃希菌中ESBLs篩選試驗陽性為92例，陽性率為48.9％，其中共檢測到ESBLs基因陽性的有85株，檢出率為92.4％。85株ESBLs基因陽性菌株中有64株攜帶CTX-M-9型基因，32株攜帶C

9、TX-M-1型基因，23株攜帶TEM型基因，1株攜帶SHV型基因，其余基因均未檢出。
　　 8.92株產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌中，毒力因子papC在CTX-M-9群中的陽性率要高于TEM群和CTX-M-1群，差異有顯著性(P＜0.05)；毒力因子aer在CTX-M-1群中的陽性率要高于TEM群和CTX-M-9群，差異有顯著性(P＜0.05)。
　　 9．CTX-M-9型在papC陽性株、aer陽性株、fyuA陽性株的檢出率

10、分別為50.0％、33.3％、36.8％，均高于其它ESBLs基因型。
　　 結(jié)論：
　　 1．毒力因子aer、fimH在不同標(biāo)本來源大腸埃希菌中的檢出率差異有顯著性，且這兩種毒力因子在尿液來源的大腸埃希菌中的表達(dá)率要高于血源性大腸埃希菌。證明Ⅰ型菌毛和產(chǎn)氣桿菌素(aer)是UPEC關(guān)鍵的毒力因子，能介導(dǎo)尿路致病性大腸埃希菌黏附并侵入尿道和膀胱的上皮細(xì)胞，增強(qiáng)UPEC菌株的存活率。
　　 2．抗菌藥物的耐藥性與某