人工設(shè)計多肽的結(jié)構(gòu)及其抗菌機理研究.pdf

1、天然抗菌肽具有安全、高效的特點，因此抗菌肽在食品添加劑領(lǐng)域中有良好的應(yīng)用前景。抗菌肽的主要生物活性為抗菌性，本論文為了揭示抗菌肽的抗菌原理，探索更高活性的抗菌肽，研究了淀粉樣多肽及其修飾后多肽的結(jié)構(gòu)和破膜性能。本文設(shè)計出兩種不同排序的氨基酸多肽，表征了兩種多肽的結(jié)構(gòu)、形貌，通過測定與脂質(zhì)體雙磷脂層的破膜作用評價抗菌肽的性能，最終揭示了抗菌活性與抗菌機理。本文首先利用馬爾文激光粒度分析儀和熒光分光光度計檢測多肽和脂質(zhì)體的作用。然后通過圓二

2、色譜、原子力顯微鏡、石英晶體微天平揭示多肽聚集體的二級結(jié)構(gòu)、形貌和聚集的動態(tài)過程。最后驗證了多肽的抗菌性能。主要研究結(jié)果如下：
　　(1)賴氨酸的引入可以減緩多肽自組裝速度，提高多肽的破膜能力。原子力顯微鏡、石英晶體微天平和圓二色譜等檢測手段揭示多肽聚集體的二級結(jié)構(gòu)、形貌和聚集的動態(tài)過程，結(jié)果顯示KKKAβ33-42自組裝速度小于Aβ33-42。通過圓二色譜證明了多肽KKKAβ33-42與脂質(zhì)體作用導(dǎo)致多肽的二級結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。通過

3、脂質(zhì)體熒光物質(zhì)泄漏實驗，發(fā)現(xiàn)引入帶正電荷的賴氨酸后多肽KKKAβ33-42對脂質(zhì)體破膜效果增強。
　　(2)成功設(shè)計出多肽KKK(FAFAFAFA)KKK和KKKKKKFAFAFAFA，通過圓二色譜、石英晶體微天平和原子力顯微鏡進行了對兩種多肽的表征。結(jié)果表明，兩種多肽隨著孵育自組裝成纖維，脂質(zhì)體對多肽K6(FA)4聚集體的構(gòu)象有影響。通過脂質(zhì)體熒光物質(zhì)泄漏實驗結(jié)果表明，K3(FA)4K3對脂質(zhì)體膜的破壞效果更強，這說明賴氨酸序列