白細胞介素-27對哮喘小鼠的預防與治療效果及機制.pdf

1、目的:
　　支氣管哮喘是一種反復發(fā)作的呼吸道慢性炎癥性疾病，其發(fā)病率和死亡率在全球范圍內(nèi)一直呈現(xiàn)上升趨勢，本文從動物水平探索白細胞介素27(IL-27)是否能減輕哮喘的過敏性氣道炎癥，并在細胞水平進行相關(guān)機制研究。
　　方法:
　　將75只雌性C57/6J小鼠隨機分成對照組、哮喘組、IL-27滴鼻預防組和IL-27滴鼻治療組。在卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏與滴鼻激發(fā)誘導的小鼠哮喘模型基礎(chǔ)上，加用IL-27干預，一種為

2、“IL-27小劑量、多次預防模型”，另一種為“IL-27大劑量、寡次治療模型”。小鼠末次激發(fā)24小時后麻醉，行氣道反應(yīng)性檢測;取小鼠肺泡灌洗液分離細胞和上清，分別進行細胞分類計數(shù)和IL-5和IL-13濃度的檢測，取肺組織進行HE染色和PAS染色，并進行炎癥病理評分。正常小鼠脾臟純化的CD4+T淋巴細胞進行體外分化實驗，并加用IL-27處理，用ELISA檢測IL-4的水平。CD4+T淋巴細胞在不同強度的Th2環(huán)境下誘導分化，用IL-27刺

3、激細胞，提取總蛋白，進行Western blot(WB)檢測信號轉(zhuǎn)導與轉(zhuǎn)錄激活子1(STAT1)和STAT1磷酸化水平。治療組小鼠末次激發(fā)24小時后處死，取肺組織進行勻漿，收集上清WB檢測肺組織STAT1和STAT1磷酸化水平。三分之一預防組小鼠，激發(fā)前一天處死，取肺組織進行勻漿，收集上清WB檢測肺組織STAT1和STAT1磷酸化水平。三分之一預防組小鼠，激發(fā)前一天處死，膠原酶消化肺組織細胞，流式檢測記憶性Th1細胞比例。
　　結(jié)

4、果:
　　IL-27小劑量、多次預防給藥，可以明顯改善OVA誘導的哮喘小鼠的氣道炎癥和氣道高反應(yīng)性(P＜0.05)，而治療組則無明顯的統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。IL-27能明顯抑制初始CD47淋巴細胞向Th2方向分化，且這種作用不依賴于γ-干擾素IL-10。隨著CD4+T細胞培養(yǎng)環(huán)境中Th2濃度逐漸增高，細胞上STAT1的磷酸化逐漸受損，IL-27對Th2分化的抑制作用逐漸減弱，且IL-27無法抑制已分化的Th2細胞的再分化。哮

5、喘動物體內(nèi)肺組織STAT1磷酸化受損，IL-27治療性給藥無法扭轉(zhuǎn)這種損傷;預防性IL-27給藥提高了小鼠哮喘激發(fā)前肺組織STAT1磷酸化水平，提高了小鼠哮喘激發(fā)前肺組織中記憶性Th1細胞的比例。
　　結(jié)論:
　　IL-27對Th2分化的抑制作用是通過STAT1通路進行的，IL-27抑制初始CD4+T淋巴細胞向Th2分化的作用非常卓越，高濃度Th2環(huán)境下或者已朝Th2分化的CD4+T細胞，由于其細胞上STAT1磷酸化的明顯受