白細(xì)胞介素-17對(duì)哮喘小鼠急性發(fā)作期的影響.pdf

1、研究目的:
　　 支氣管哮喘，是由多種細(xì)胞特別是肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞(Eosinophile granulocyte，Eos)和T淋巴細(xì)胞參與的慢性氣道炎癥，其中，Eos浸潤(rùn)是其中一重要環(huán)節(jié)。哮喘的發(fā)病與患者個(gè)人過敏性體質(zhì)及環(huán)境因素有關(guān)，其發(fā)病機(jī)制涉及免疫炎癥反應(yīng)、神經(jīng)機(jī)制、氣道高反應(yīng)及其之間的相互作用。其中，免疫炎癥反應(yīng)中體液免疫與細(xì)胞免疫均參與哮喘的發(fā)病。
　　 變應(yīng)原初次作用于機(jī)體后，通過抗原提呈作用激活T細(xì)胞，

2、激活的Th細(xì)胞分泌IL-4、IL-13等細(xì)胞因子作用于B淋巴細(xì)胞，B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生特異性的IgE，并結(jié)合于肥大細(xì)胞及Eos表面的IgE受體。當(dāng)同種變應(yīng)原再次進(jìn)入機(jī)體后，可迅速作用于肥大細(xì)胞及Eos，使其激活并產(chǎn)生釋放組胺、白三烯等多種細(xì)胞活性因子，導(dǎo)致平滑肌收縮，腺體分泌增加，血管透性增加，炎細(xì)胞浸潤(rùn)等多種效應(yīng)。同時(shí)Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子可直接作用于Eos、肥大細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞等細(xì)胞，這些細(xì)胞相互作用分泌前列腺素、eota

3、xin、血小板活化因子等多種細(xì)胞因子，構(gòu)成一個(gè)復(fù)雜的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)。白細(xì)胞介素-17(Interleukin-17，IL-17)是近年來發(fā)現(xiàn)的與哮喘急性發(fā)作密切相關(guān)的細(xì)胞因子，可以誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞表達(dá)多種細(xì)胞因子，如白細(xì)胞介素-6(Interleukin-6，IL-6)，白細(xì)胞介素-8(Interleukin-8，IL-8)，粒細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte-colony stimulating factor，G-C

4、SF)及粒細(xì)胞趨化蛋白-2等，共同催化多種細(xì)胞在氣道內(nèi)浸潤(rùn)，這些炎癥細(xì)胞相互作用又可以分泌多種細(xì)胞因子，構(gòu)成炎癥細(xì)胞及炎癥因子之間的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)。本研究對(duì)IL-17在小鼠哮喘急性發(fā)作期的作用進(jìn)行了細(xì)致研究。
　　 本研究通過卵蛋白致敏和激發(fā)建立小鼠動(dòng)物哮喘模型，經(jīng)鼻給予IL-17干預(yù)后，觀察其對(duì)小鼠Eos及其趨化因子的作用，探討IL-17對(duì)小鼠Eos的影響。從而可以探究哮喘急性發(fā)作期，細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)內(nèi)各細(xì)胞因子的相互作用，為哮喘急性發(fā)

5、作的機(jī)制有進(jìn)一步的了解，并為治療提供依據(jù)。
　　 研究方法:
　　 隨機(jī)將60只balb/c雌性小鼠分為健康組(A)、對(duì)照組(B)、哮喘組(C)、IL-17抗體組(D)及IL-17組(E)，各12只。A組不做特殊處理，B、C、D、E4組采用卵蛋白致敏和激發(fā)的方法，建立哮喘模型，給予B、C、D、E4組小鼠生理鹽水、OVA、OVA+IL-17抗體（鼻內(nèi)激發(fā)）、OVA+IL-17鼻內(nèi)激發(fā)處理，其各組劑量分別為C組：OVA100

6、μg；D組：OVA100μg、抗IL-17抗體5μg；E組：OVA100μg、IL-170.1μg，以上各組都溶于0.9％的生理鹽水40μL中。B組直接給予0.9％的生理鹽水40μL。采用HE染色肺組織病理切片觀察炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，采用ELISA法檢測(cè)小鼠肺組織勻漿上清液中嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子（Eotaxin-1）。
　　 結(jié)果:
　　 (1)小鼠有雙前肢搔動(dòng)口鼻、呼吸急促、腹肌抽搐、毛發(fā)豎起、二便失禁等表現(xiàn)，且肺組織切片示

7、支氣管、血管周圍、肺間質(zhì)及肺泡腔有數(shù)量不等的各種炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，包括Eos、中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等各種炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；氣道上皮損傷，結(jié)構(gòu)紊亂；氣道內(nèi)杯狀細(xì)胞肥大增生，氣道內(nèi)有大量黏液分泌，并有黏液栓形成等。通過卵蛋白致敏和激發(fā)的方法建立小鼠哮喘模型成功。
　　 (2)C、D、E組小鼠可見氣道炎癥以嗜酸性粒細(xì)及中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)為主，而B組變化較輕，A組正常；
　　 (3)Eotaxin-1濃度從高到低依次為C、D、E、B、A組(