納他霉素菌種選育與發(fā)酵工藝研究.pdf

1、納他霉素(Natamycin),是一種二十六元多烯大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,主要由恰塔努加鏈霉菌(Streptomyces chattanovgensis)、納塔爾鏈霉菌(Streptomycesnatulonso)和褐黃孢鏈霉菌(Streptomyces gilvosporeus)等產(chǎn)生菌經(jīng)發(fā)酵過程生產(chǎn)。納他霉素是一種高效、廣譜的抗真菌抗生素,能有效地抑制酵母菌和霉菌的生長,在醫(yī)療、食品等方面顯示了良好的應(yīng)用前景。本論文對納他霉素產(chǎn)生菌的菌種

2、選育及發(fā)酵生產(chǎn)進行了系統(tǒng)的研究,重點進行了納他霉素的定量分析方法、菌種誘變和選育、發(fā)酵工藝及發(fā)酵動力學(xué)等方面的研究。建立了測定S. gilvosporeus發(fā)酵液中納他霉素含量的反相高效液相色譜法。該方法的日內(nèi)和日間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.15％和0.90%:對照品濃度為92,184,368μg/ml時,加樣回收率分別為99.84%,101.18%和101.41%;線性相關(guān)系數(shù)為0.9998。該方法具有操作簡單、快速靈敏、準(zhǔn)確性好等優(yōu)點,

3、可作為納他霉素的定量分析方法。根據(jù)納他霉素的生物合成途徑和代謝調(diào)節(jié)機理,對納他霉素產(chǎn)生菌褐黃孢鏈霉菌(S. gilvosporeus)進行誘變和選育,旨在獲得高產(chǎn)菌株。以S. gilvosporeus1-12為出發(fā)菌株,經(jīng)紫外誘變篩選乙酸鈉、丙酸鈉、硫酸鏈霉素抗性突變株,并結(jié)合自然分離純化,最終獲得高產(chǎn)突變株S. gilvosporeus B-5,其搖瓶發(fā)酵效價達(dá)1.055g/L,較出發(fā)菌株生產(chǎn)能力提高68%。對納他霉素的搖瓶發(fā)酵進行了

4、研究,考察了種齡、接種量、裝液量、發(fā)酵培養(yǎng)基初始pH、溫度、前體對納他霉素發(fā)酵的影響。同時對斜面培養(yǎng)基,種子培養(yǎng)基進行了優(yōu)化,使菌株達(dá)到較佳的生長狀態(tài)和更高的發(fā)酵單位?？偨Y(jié)出一套適于菌體生長和提高發(fā)酵單位的培養(yǎng)方法。以搖瓶發(fā)酵試驗結(jié)果為基礎(chǔ),進行了納他霉素發(fā)酵由搖瓶到5 L發(fā)酵罐的放大,分別進行了分批發(fā)酵和分批補料發(fā)酵,使納他霉素發(fā)酵單位進一步提高到2.856g/L,比該菌種搖瓶發(fā)酵水平提高了170.7%。對納他霉素發(fā)酵動力學(xué)進行了研究