汕頭牛田洋鋸緣青蟹病害發(fā)生的環(huán)境因素及中草藥防治研究.pdf

1、鋸緣青蟹屬肉食性、廣鹽、廣溫性海水經濟甲殼動物，是我國東南沿海地區(qū)重要的海洋經濟養(yǎng)殖蟹類，也是汕頭市的傳統(tǒng)特色優(yōu)勢水產養(yǎng)殖品種。自2004年秋冬以來，每年9～11月，汕頭牛田洋養(yǎng)殖區(qū)的青蟹病害嚴重，經濟損失較大。為了探討青蟹病害的原因，尋找有效的病害治療和防控方法，本課題組對此進行了較系統(tǒng)的研究?，F已查明：副溶血弧菌、嗜水氣單胞菌和寄生性腰鞭毛蟲是牛田洋青蟹的主要病原。本文主要從養(yǎng)殖水體理化因子和生物因子等方面，探討了青蟹病害發(fā)生與養(yǎng)殖

2、環(huán)境的關系。主要研究內容及結果如下：
　　 ⑴牛田洋青蟹病害爆發(fā)的環(huán)境因素從牛田洋圍墾區(qū)大順公司的水產養(yǎng)殖基地選取4個100畝左右的青蟹養(yǎng)殖池塘作為采樣、監(jiān)測點，于2007年和2008年的4～12月，每月進行1～2次的定點環(huán)境監(jiān)測、采樣及病害調查，分析測定如下指標：水體的溫度、鹽度、溶解氧、pH，亞硝態(tài)氮(NO2--N)、硝態(tài)氮(NO3--N)、銨態(tài)氮(NH4+-N)及無機磷(PO43--P)的含量，化學耗氧量(COD)，細菌數

3、量(弧菌和異養(yǎng)菌)；池塘底泥的細菌數量。結果發(fā)現：在07年和08年，養(yǎng)殖環(huán)境各因子與病害爆發(fā)都呈現出明顯的季節(jié)性變化，且變化趨勢基本一致。4～8月，青蟹健康狀況良好，基本沒有病害發(fā)生；自9月中下旬開始出現青蟹病害，10月份病害尤為嚴重，主要表現為黑鰓、甲殼黃斑、體內腹水等癥狀。兩年內，各指標的變化范圍：NH4+-N 76.63～235.63 μg·L-1、NO2--N6.15～27.75μg·L-1、NO3--N22.33～174.83

4、 μg·L-1、PO43--P 8.27～44.81 μg·L-1、水體異養(yǎng)菌27.25×105～157.93×105 cfu·L-1、水體弧菌9.75×103～116.75×103 cfu·L-1、底泥異養(yǎng)菌27.75×105～733.25 × 105 cfu·dw-1·g-1、底泥弧菌0.13×103～141.65×103 cfu·dw-1·g-1，它們的峰值均出現在病害高發(fā)的9～10月份；溶解氧和pH的變化范圍分別是4.12～7.

5、80 mg·L-1和6.21～8.22，它們的低值也出現在病害高發(fā)的9～10月份。結果表明：水體理化因子的惡化和條件致病微生物的大量增生是青蟹病害爆發(fā)的重要原因之一。
　　 ⑵中草藥防治青蟹細菌性病害的初步研究通過藥敏紙片法和倍比稀釋法，分別測定了五倍子、連翹、貫眾、地榆、大黃、黃芩、烏梅、黃連、馬齒莧、石榴皮、益智仁、五味子等12 味中草藥對副溶血弧菌和嗜水氣單胞菌的藥物敏感性、最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)。

6、結果顯示，五倍子、烏梅和黃蓮等對兩菌株均具有明顯的抑制作用，抑菌圈都大于19 mm，MIC均小于3.12 mg·mL-1。其中五倍子對兩菌株的抑殺效果最明顯，對副溶血弧菌和嗜水氣單胞菌的抑菌圈分別達到37.00 和42.29 mm，對兩株菌的MIC和MBC分別為0.19 和0.39 mg·mL-1。黃蓮、石榴皮、馬齒莧、大黃、五味子等對菌株有一定的抑殺作用，但貫眾、石榴皮和益智仁的抑殺作用不明顯。接著，利用五倍子對青蟹副溶血弧菌病進行防

7、治試驗。實驗設置4 個組：陰性對照組(青蟹注射0.1 mL生理鹽水，不藥?。?、陽性感染組(注射0.1mL8×107cfu·mL-1副溶血弧菌，不藥?。?、五倍子治療組(注射感染菌株后8h，用20mg·L-1藥液進行藥浴3 天）和五倍子對照組(注射生理鹽水，藥浴同治療組），每組2 個重復，每個重復6只青蟹。通過比較各組間青蟹的累積死亡率(CM)，血淋巴中的細菌數量(TBC)及總血細胞數量(THC)，血清中的酚氧化酶(PO)、溶菌酶(LSZ)

8、、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、酸性磷酸酶(ACP)及堿性磷酸酶(AKP)的活力，血清抗菌活力(ABA)、葡萄糖(Glu)及可溶性蛋白(Pro)的含量等免疫與代謝指標，以探究五倍子對感染副溶血弧菌青蟹的治療效果，評估藥浴對健康青蟹是否有副作用。結果顯示，陽性感染組在染菌后第4 的CM即達100％，TBC顯著增加，在感染二天后就達到105數量級，同時THC、PO、LSZ、ABA等指標較陰性對照組明顯要低；五倍子治療組7天

9、的CM為25％，與陽性感染組相比，其TBC、THC、PO、LSZ、ABA等指標在治療后第二天都有顯著改善，到第七天時，各指標基本恢復到健康水平、與陰性對照組無顯著差異；與陰性對照組相比，五倍子對照組青蟹除THC稍有降低外，其他指標均沒有明顯變化。結果表明，副溶血弧菌能引起青蟹較高的死亡率，注射107cfu·mL-1菌液4天后即全部死亡；20mg·L-1的五倍子藥液能有效治療青蟹由副溶血弧菌引起的疾病，該濃度藥液對青蟹的免疫與代謝指標基本