抗病毒中草藥的篩選及其對擬穴青蟹部分血清免疫因子的影響.pdf

1、擬穴青蟹（Scyllaparamamosain）俗稱青蟹，是我國沿海地區(qū)非常重要的養(yǎng)殖品種。但是，隨著養(yǎng)殖面積的擴大和養(yǎng)殖密度的增加，青蟹病害呈越來越高發(fā)的趨勢。由病毒、細菌和寄生蟲等導致的病害問題，嚴重阻礙了青蟹養(yǎng)殖業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。近年來，江浙、廣東、福建等青蟹主要養(yǎng)殖地區(qū)出現(xiàn)了嚴重的疾病，青蟹雙順反子病毒-1（Mud crab dicistrovurus-1）和青蟹呼腸孤病毒在養(yǎng)殖青蟹和野生青蟹中都有較高的攜帶率，是導致疾病發(fā)生

2、的重要病原。對于病毒病來說，沒有有效的治療藥物，提前預防是降低病害發(fā)生，減少經(jīng)濟損失的重要途徑。中草藥不僅能夠殺菌消毒、促進水生動物的生長，而且能夠增強其免疫功能、提高抗病能力。本文通過利用中草藥水提取物浸泡擬穴青蟹，通過比較成活率，篩選抗病毒中草藥，并研究這些中草藥對青蟹部分血清免疫因子的影響，探討抗病機理。
　　首先，經(jīng)過預備實驗，用200種中草藥水提取物對擬穴青蟹進行浸泡，篩選出能夠提高擬穴青蟹成活率的中草藥。篩選出的中草藥

3、有：虎杖、青葙子、香薷、天花粉、番石榴葉、苦參、車前草、射干、菟絲子、夏枯草、百部、白芷、柴胡、龍膽草、石榴皮和連翹16種中草藥，他們的成活率分別為：51.1％，38%,40%，56%,50%，40%,42%，60%,30%，38%,40%，40%,47%，31%，42%，50%。對照組成活率為33%，除了龍膽草和菟絲子外，其他中草藥浸泡擬穴青蟹的成活率均高于對照組。由累計死亡率結果可知，各組擬穴青蟹在用藥后第三天均開始死亡。檢測死亡擬

4、穴青蟹蟹鰓后，發(fā)現(xiàn)番石榴葉、車前草和石榴皮水提取物浸泡擬穴青蟹沒有檢測出病毒。說明這三種中草藥水提取物能夠抑制青蟹病毒繁殖。
　　其次，通過對青蟹的幾個免疫因子進行調(diào)查。發(fā)現(xiàn)在殼長和體重相似的情況下，不同肥滿度青蟹的免疫功能不同。養(yǎng)殖青蟹血清中的LSZ、PO、ACP、AKP活性與肥滿度之間的相關性極顯著，其中LSZ活性符合二次曲線方程、PO活性符合S曲線方程、AKP活性和ACP活性冪方程的規(guī)律。而野生青蟹只有SOD與肥滿度之間相關

5、性極顯著，符合對數(shù)方程規(guī)律。
　　最后，研究了番石榴葉、連翹、天花粉和甘草水提物對擬穴青蟹免疫功能的影響。其中，番石榴葉水提取物浸泡青蟹后，擬穴青蟹血清ACP、AKP、SOD和LSZ等免疫相關酶活性都呈現(xiàn)先升高，而后降低并趨于平穩(wěn)的變化趨勢。實驗組青蟹血清AKP活性和LSZ活性于24小時時達到最大值，且均顯著高于對照組（P<0.05）；而ACP活性和SOD活性于48小時時達到最大值，且均顯著高于對照組（P<0.05）；72小時時對

6、照組青蟹PO活性突然急劇升高，且顯著高于實驗組（P<0.05），其余時間實驗組與對照組間差異不顯著（P>0.05）；AKP只在24h達到最大值，并顯著高于對照組（P<0.05）。連翹組青蟹血清ACP活性PO活性、AKP活性在48h達到最大值，并顯著高于對照組(P<0.05)，SOD和LSZ活性在24h達到最大值，與對照組差異不顯著（P>0.05）；天花粉組青蟹血清ACP和AKP在24達到最大值，并且顯著高于對照組（P<0.05）,LSZ

7、和PO活性在48h達到最大值，顯著高于對照組（P<0.05）,SOD活性在各時間點與對照ACP組差異不顯著；甘草組青蟹血清ACP和AKP在24達到最大值，并且顯著高于對照組（P<0.05）,LSZ和PO活性在48h達到最大值，顯著高于對照組（P<0.05）,SOD活性在各時間點與對照組差異不顯著。說明被篩選出的中草藥在提高青蟹免疫功能方面具有不同的作用。
　　總之，本研究通過從大量中草藥中篩選能夠提高青蟹免疫功能的中草藥，然后通過