同種異體去細(xì)胞外周神經(jīng)支架與細(xì)胞外ATP誘導(dǎo)聯(lián)合移植的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:制備去細(xì)胞同種異體神經(jīng)支架并利用其對神經(jīng)軸突生長的引導(dǎo)作用,聯(lián)合細(xì)胞外ATP對神經(jīng)軸突生長的誘導(dǎo)作用和延緩失神經(jīng)支配骨骼肌萎縮作用,修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)10nm缺損,研究該聯(lián)合方法修復(fù)神經(jīng)缺損的效果,為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　 方法:取材大鼠的雙側(cè)坐骨神經(jīng),采用TritonX-100與脫氧膽酸鈉序貫脫細(xì)胞處理、降低其免疫原性,制備成僅有細(xì)胞外組織的同種異體神經(jīng)支架;將SD大鼠64只,隨機(jī)分4組,每組16只;分別是實(shí)驗(yàn)組(G

2、roupA)、自體神經(jīng)移植組(GroupB)、空白組(GroupC)、正常組(GroupD),前三組做成右側(cè)坐骨神經(jīng)缺損模型后分別如下處理:A組:用脫細(xì)胞異體神經(jīng)橋接坐骨神經(jīng)缺損,術(shù)后右側(cè)腓腸肌注射ATP;B組:用自體坐骨神經(jīng)原位橋接坐骨神經(jīng)缺損;C組:做成動物模型后縫合皮膚。術(shù)后3個月、6個月做足印實(shí)驗(yàn),計算坐骨神經(jīng)功能指數(shù)(SFI)、電生理檢測計算坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度(NCV)、甲苯氨藍(lán)染色檢查,計算神經(jīng)軸突平均面積和密度、透射電鏡觀察

3、再生神經(jīng)超微細(xì)結(jié)構(gòu)、測定肌濕重、乙酰膽堿酯酶(AchE)染色觀察運(yùn)動終板(MEP)形態(tài)變化。
　　 結(jié)果:大體觀察:手術(shù)的三組大鼠術(shù)后均出現(xiàn)不同程度的右后足失神經(jīng)性營養(yǎng)不良改變,以C組明顯,A組和B組相似。術(shù)后三個月和六個月,A組和B組有部分功能恢復(fù),且兩組6個月時恢復(fù)效果好于3個月,但仍差于D組;C組于3個月和6個月均無可視性功能恢復(fù)。A組與B組再生神經(jīng)外觀與正常神經(jīng)組織相似;C組無神經(jīng)或其它組織相連。坐骨神經(jīng)功能指數(shù)與腓腸肌

4、濕重:不論是術(shù)后3個月還是6個月,A、B組間差別無統(tǒng)計學(xué)意義,均好于C組而差于D組,且6個月時好于3個月;A組再生神經(jīng)有髓神經(jīng)纖維軸突的密度不及B組,與D組間差別無統(tǒng)計學(xué)意義;A組有髓神經(jīng)纖維軸突的面積大于B組,小于D組;3個月時B組坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度(NCV)大于A組,小于D組;6個月時A、B組差別無統(tǒng)計學(xué)意義,但均小于D組;空白對照組無神經(jīng)再生證據(jù)。
　　 結(jié)論:1、去細(xì)胞同種異體神經(jīng)支架可以引導(dǎo)神經(jīng)軸突的再生,不引起明顯的排