新型信號放大型DNA分子機器的研究及應(yīng)用.pdf

1、青島科技大學(xué)碩士學(xué)位論文新型信號放大型DNA分子機器的研究及應(yīng)用姓名：房叢叢申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：應(yīng)用化學(xué)指導(dǎo)教師：張書圣；張慧20110610器操作lh，可使檢測DNA的靈敏度增加兩個數(shù)量級，在優(yōu)化的實驗條件下，檢測靶DNA的線性范圍是1010～6mol／L—101014moFL，檢測限可達28x10J7mol／L(3s)，放大效率更高。同時，以磁珠為DNA的固相載體，便于循環(huán)反應(yīng)的控制，同時實現(xiàn)了信號DNA從DNA分子機器本體的輸

2、出。此外，將適體識別元件與DNA分子機器相結(jié)合，以三磷酸腺苷(ATP)為模板分子，考察了這種新型DNA分子機器的性能，并實現(xiàn)了癌細胞中ATP的檢測。在優(yōu)化的實驗條件下檢測ATP的線性范圍是20108moFL一20l曠mol／L，檢測限為4710。9mol／L(3s)?？傊?，這種新型DNA機器結(jié)構(gòu)簡單，可自動化運行且信號放大效率高。通過改變DNA序列，更可應(yīng)用到多種適體小分子的檢測中，具有潛在的應(yīng)用價值。三、DNA分子機器雙循環(huán)放大檢測D

3、NA構(gòu)建了一種通過雙循環(huán)放大檢測目標DNA的DNA分子機器。雙循環(huán)工作模式包含鏈斷裂自循環(huán)模式和鏈斷裂交叉循環(huán)模式，這兩種循環(huán)模式均通過兩種不同的內(nèi)切酶協(xié)同來完成。采用生物條碼的CdS納米粒子—DNA探針組裝到DNA分子機器系統(tǒng)來尋蹤目標DNA。當目標DNA進入到系統(tǒng)中，DNA機器就會被觸發(fā)，然后自主的進行雙循環(huán)工作模式來產(chǎn)生信號，整個過程可以根據(jù)需要來很好的控制。信號的檢出是通過在酸性溶液中溶解CdS納米粒子—DNA探針，然后使用DP

4、ASV方法對獲得的Cd2進行檢測。Cd2在063V，同時獲得了相應(yīng)目標DNA濃度的對應(yīng)電信號，從而達到檢測目的。在優(yōu)化的實驗條件下，檢測靶DNA的線性范圍是101016mol／L一801014moVL，檢測限為41x10‘17mol／L(3s)。因此，該DNA分子機器能夠顯著放大DNA。盡管這種DNA分子機器有復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，但是它能通過簡單的操作來連續(xù)的執(zhí)行類似機器的行為，且整個檢測過程在室溫下操作30min就可以完成，方法靈敏度高，選擇