混菌發(fā)酵豆粕的工藝研究及其特性分析.pdf

1、發(fā)酵豆粕，是以豆粕為基礎(chǔ)物質(zhì)，通過微生物發(fā)酵來消除抗?fàn)I養(yǎng)因子，有效地分解大豆蛋白成為優(yōu)良的肽源，擁有加快營養(yǎng)物質(zhì)分解吸收、增進(jìn)生長和改善適口性等功效。本課題主要進(jìn)行了產(chǎn)蛋白酶霉菌的分離篩選鑒定，米曲霉單菌發(fā)酵豆粕條件的優(yōu)化，混菌發(fā)酵豆粕工藝條件的探討以及發(fā)酵豆粕產(chǎn)品的營養(yǎng)成分的比較。
　　首先，從自然發(fā)酵的豆粕中分離篩選產(chǎn)蛋白酶的霉菌菌株，通過對蛋白酶活和降解豆粕的比較以及ITS序列分析，最終得到蛋白酶活較強(qiáng)的安全菌株米曲霉。以米

2、曲霉為出發(fā)菌株，酸溶蛋白含量為指標(biāo)，利用單因素和正交對其發(fā)酵豆粕的工藝條件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明:米曲霉發(fā)酵豆粕的時間為72 h、溫度為32℃、料水比1∶0.5、接種量為10％的條件下，豆粕中的酸溶性蛋白的含量為13.87％。
　　其次，探討了篩選出的米曲霉與枯草芽孢桿菌、釀酒酵母協(xié)同降解豆粕的條件。通過菌株之間的共同培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)三株菌之間不存在拮抗性。以酸溶蛋白含量為指標(biāo)，利用單因素試驗篩選降解豆粕的最佳接種順序、發(fā)酵時間、接種比例、

3、接種量等。并進(jìn)一步進(jìn)行三因素三水平的Box-Behnken試驗設(shè)計及響應(yīng)面分析，對混菌發(fā)酵豆粕的條件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明:接種順序為先接枯草芽孢桿菌，24h后接種釀酒酵母和米曲霉，發(fā)酵時間72 h，接種比例是枯草芽孢桿菌∶釀酒酵母∶米曲霉=1∶1∶2，總接種量10％，料水比1∶0.6，發(fā)酵溫度32℃，在此條件下，混菌發(fā)酵豆粕的酸溶蛋白含量為20.73％，對豆粕的降解效果較好，為進(jìn)一步開發(fā)功能性飼料提供了依據(jù)。
　　最后，研究了發(fā)酵豆

4、粕的營養(yǎng)成分，從感官評價、基礎(chǔ)物質(zhì)、有害物質(zhì)、氨基酸和SDS-PAGE五個方面進(jìn)行分析。結(jié)果表明:米曲霉混菌發(fā)酵豆粕比米曲霉單菌發(fā)酵豆粕的效果要好;混菌發(fā)酵豆粕產(chǎn)品與原豆粕相比粗蛋白的含量提高了11.54％，水分和粗灰分含量與發(fā)酵前相比有所下降;有害物質(zhì)植酸的含量比發(fā)酵前下降了32％，脲酶活性低至0.021 U/g;氨基酸總含量從43.4％提高到46.8％，提高率為7.8％，其中必需氨基酸均有提高;分子量大的蛋白質(zhì)被降解為小分子的肽和氨