銅綠假單胞菌耐藥分析與耐亞胺培南菌株基因型檢測研究.pdf

1、目的：1.回顧性分析貴陽市某三甲醫(yī)院2011年1月到2014年12月銅綠假單胞菌的臨床感染分布及對常用抗生素的耐藥情況，為臨床合理使用抗生素提供參考。2.選取該院 ICU耐亞胺培南的銅綠假單胞菌,對其產(chǎn)碳青霉烯酶和外膜通道蛋白 D2(OprD2)的分布情況進行研究，初步探討該院 ICU銅綠假單胞菌對亞胺培南耐藥的機制。3.了解該院ICU銅綠假單胞菌耐藥菌株的分子流行病學(xué)特性，為進一步指導(dǎo)臨床有效控制耐藥菌株在醫(yī)院內(nèi)的傳播提供依據(jù)。

2、>　　方法：1.采用 WHONET5.6軟件對四年間該院分離出的銅綠假單胞菌的標(biāo)本來源、感染科室及耐藥情況進行回顧性分析；2.收集該院ICU2010年到2014年臨床分離的非重復(fù)耐亞胺培南銅綠假單胞菌67株進行如下檢測：（1） EDTA雙紙片協(xié)同試驗對耐亞胺培南菌株產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶情況進行篩選；（2）利用聚合酶鏈反應(yīng)( Polymerase Chain Reaction，PCR)技術(shù)檢測耐亞胺培南菌株碳青霉烯酶基因和外膜孔道蛋白 D2

3、(OprD2)存在情況，并將其測序結(jié)果與 GenBank數(shù)據(jù)庫進行比對；（3）應(yīng)用腸桿菌科重復(fù)一致序列（ Enterobacter repetitive intergenic consensus，ERIC）法對耐亞胺培南菌株進行流行病學(xué)研究，確定耐藥菌株的親緣關(guān)系。
　　結(jié)果：1.回顧性耐藥分析結(jié)果顯示：四年內(nèi)，銅綠假單胞菌對環(huán)丙沙星、左氧氟沙星的耐藥率最高，對阿米卡星的耐藥率最低；2011年到2014年間，除了替卡西林、左氧氟沙

4、星、氨曲南以外，其他抗菌藥物的耐藥率均逐年下降（P＜0.05）；四年共分離出銅綠假單胞菌2125株，以呼吸道標(biāo)本、分泌物標(biāo)本、尿液標(biāo)本為主，其中呼吸道標(biāo)本的分離率最高。臨床感染科室主要集中在外科、內(nèi)科、ICU，其中ICU分離株耐藥率高于其他科室。2. EDTA雙紙片協(xié)同試驗結(jié)果顯示：分離自ICU的67株耐亞胺培南菌株中有17株產(chǎn)生金屬酶基因；PCR結(jié)果顯示:67株銅綠假單胞菌中中有10株標(biāo)本VIM陽性，8株IMP陽性，4株SPM陽性，6

5、株OXA-10基因陽性，其中有5株同時含有兩種或兩種以上基因，未檢出GIM、SIM基因；39株顯示Oprd2基因的缺失。3.通過 ERIC-PCR分型將來自 ICU67株耐亞胺培南的銅綠假單胞菌菌株分為 ABCDEFGH八種類型， 其中A型（5株）、B型（2株)、C型（1株）、D型（3株）、E型（3株）、F型（14株）、G型（15株）、H型（24株）。
　　結(jié)論：1.該院銅綠假單胞菌對常用抗菌藥物的耐藥率呈逐年下降趨勢；