血管生成素在腹透時腹膜血管新生中的作用研究.pdf

1、長期腹膜透析（腹透）后腹膜發(fā)生血管新生和通透性增加，導(dǎo)致腹膜超濾減少，是患者退出腹透的主要原因之一。然而，腹膜血管新生和通透性增加的機(jī)制目前尚不清楚。血管生成素及其受體是近期發(fā)現(xiàn)的與血管新生和功能改變密切相關(guān)的一類細(xì)胞因子。本研究通過在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中觀察腹膜血管新生和血管生成素及其受體之間的關(guān)系，探索腹膜血管新生機(jī)制，為防治腹膜血管新生長期保存腹膜功能尋找新的思路。 研究內(nèi)容如下： 一、體外實(shí)驗(yàn) 腹透流出液中腫瘤壞

2、死因子（TNF-α）濃度增加和腹膜血管新生及通透性增加正相關(guān)，目前其中的機(jī)制尚未明了。近期發(fā)現(xiàn)血管生成素及其受體Tie-2在血管新生和功能改變中起重要作用。TNF-α促進(jìn)血管新生和通透性增加的作用和血管生成素（Angiopoietin，Angpt）及其受體Tie-2之間的關(guān)系還不清楚?？扇苄訲ie-2/Fc融合蛋白（sTie-2/Fc）類似Tie-2的細(xì)胞外段，大量的sTie-2/Fc可以和Tie-2競爭結(jié)合血管生成素阻礙其作用。本研究

3、觀察TNF-α作用于原代培養(yǎng)的人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞后細(xì)胞增殖能力、形成管狀結(jié)構(gòu)能力、遷移能力及對異硫氰酸熒光素牛血清白蛋白（FITC-BSA）通透性變化，同時觀察TNF-α合并使用sTie-2/Fc后細(xì)胞上述功能改變。結(jié)果顯示TNF-α促進(jìn)人腹膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞管狀結(jié)構(gòu)形成和遷移，這些作用被sTie-2/Fc拮抗。TNF-α也能促進(jìn)細(xì)胞通透性增加，但sTie-2/Fc對細(xì)胞通透性無顯著影響。TNF-α對細(xì)胞增殖能力無顯著影響。從體外實(shí)驗(yàn)我

4、們推測TNF-α促進(jìn)腹膜血管新生和血管生成素有關(guān)。 二、體內(nèi)實(shí)驗(yàn) 尿毒癥及非生物相容性腹透液均會引起腹膜血管新生，最終導(dǎo)致腹膜超濾衰竭，患者不得不退出腹透。但目前腹膜血管新生的確切機(jī)制尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)通過觀察尿毒癥腹透大鼠腹膜血管數(shù)變化；腹膜轉(zhuǎn)運(yùn)和超濾能力的變化；腹膜上血管生成素-1（Angpt-1）、血管生成素-2（Angpt-2）、和它們的受體Tie-2、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）等與血管新生密切相關(guān)的細(xì)胞因子表達(dá)

5、量變化；及細(xì)胞因子表達(dá)量變化和腹膜結(jié)構(gòu)和功能變化之間的關(guān)系來探索腹膜血管新生機(jī)制。實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)尿毒癥組大鼠較對照組大鼠，腹透組大鼠較尿毒癥組大鼠腹膜VEGF、Angpt-2基因及蛋白表達(dá)增加，血管數(shù)增加，腹膜轉(zhuǎn)運(yùn)能力增強(qiáng)、超濾減少。VEGF、Angpt-2表達(dá)量增加和腹膜血管數(shù)正相關(guān)；血管數(shù)增加和腹膜肌酐清除能力正相關(guān)，和腹透液凈超濾量負(fù)相關(guān)。不同透析時間組大鼠之間腹膜VEGF、Angpt-2表達(dá)量，血管數(shù)以及腹膜轉(zhuǎn)運(yùn)和超濾功能無顯著差異

6、。Angpt-1表達(dá)量在各組大鼠之間比較無顯著差異。Tie-2隨著Angpt-2的表達(dá)增加而減少。從以上實(shí)驗(yàn)我們得出，尿毒癥和非生物相容性腹透液均會引起腹膜血管新生，導(dǎo)致腹膜超濾減少。Angpt-2表達(dá)上調(diào)和尿毒癥腹透大鼠腹膜血管數(shù)正相關(guān)，抑制Angpt-2表達(dá)是腹膜血管新生治療的另一靶點(diǎn)。 總之，通過以上研究我們發(fā)現(xiàn)血管生成素及其受體在長期腹透時調(diào)節(jié)腹膜血管新生中起了重要的作用。這些發(fā)現(xiàn)加深了我們對腹透中血管新生分子機(jī)制的了解