重組酵母工程菌合成谷胱甘肽的研究.pdf

1、學位論文獨創(chuàng)性聲明學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得直昌太堂或其他教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何i貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名c手寫，：降們司簽字日期：砷年歹月／1日學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學位論文作者完

2、全了解直昌太堂有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南昌大學可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編本學位論文。同時授權(quán)中國科學技術(shù)信息研究所和中國學術(shù)期刊(光盤版)電子雜志社將本學位論文收錄到《中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫》中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡向社會公眾提供信息服務。(

3、保密的學位論文在解密后適用本授權(quán)書)學位論文作者簽名(手寫)：體舸利導師簽名(手寫)：茅茭量殤f簽字日期：圳歲年‘月J日簽字日期：彬年廠月／日7摘要液中GSH的含量達到15002mg／L，比優(yōu)化前提高了2398％。(3)根據(jù)酵母菌培養(yǎng)液的吸光度與其菌體干重之間的相關(guān)性，在對數(shù)生長期和菌體穩(wěn)定期可以通過測定培養(yǎng)液的OD600來計算菌體的干重，迅速而準確的獲得各種條件下的生物量。采用兩步添加氨基酸和一步給予過氧化氫氧化應力來提高釀酒酵母GS

4、H的含量：在發(fā)酵前期6h時，添加10IIⅡ110l／L的半胱氨酸，GSH含量為2247mg／L，比對照組(16002mg／L)提高了4053‰在此基礎(chǔ)上，在對數(shù)中期14h時，添加總濃度為30nHnol／L的氨基酸混合液，GSH含量達到2679m∥L，比對照組提高了6742％，再在此基礎(chǔ)上，在穩(wěn)定期24h添加1mol／L的過氧化氫，最終GSH含量達到2867mg／L，比對照組提高了7917％。(4)利用酵母細胞作為全細胞酶催化合成GSH。

5、為了提高GSI的細胞通透性，在酶反應體系中添加04％1ritonX100，在反應36h時，GSH的透過率達到87％。在此條件下，STS013，STS013／GSHl，STS013／GSH2，STS013／GSHlGSH2細胞酶催化合成GSH的濃度分別為34906mg／L，48813mg／L，38897mg／L，40524mg／L。STS013／GSHl，STS013／GSH2，STS013／GSHlGSH2酶催化合成的GSH產(chǎn)量比在同樣

6、催化反應條件下宿主菌株STS013的GSH產(chǎn)量分別提高了40％，11％和16％。在酶反應液中同時加入STS013／GSHl和STS013／GSH2兩種菌體細胞，當細胞量配比為4：1時的，催化合成GSH的活力最高，反應48h，GSH產(chǎn)量達到53725m∥L；比單獨使用STS013／GSHl或STS013／GSH2催化合成的GSH產(chǎn)量分別提高了10％和38％。在STS013／GSHl和STS013／GSH2細胞量配比為4：1時，利用兩階段催