利用麩皮生物發(fā)酵制備低聚糖的研究.pdf

1、低聚糖是一種具有適用范圍廣和應(yīng)用前景好的新型產(chǎn)品，它集營養(yǎng)、保健、食療功能于一體，常應(yīng)用于食品、保健品、飲料、醫(yī)藥、飼料添加劑等多個領(lǐng)域，其趨勢是將取代蔗糖成為新型功能性糖源。麩皮中含有大量的纖維素和半纖維素，開發(fā)利用麩皮中的纖維素和半纖維素制備低聚糖是當(dāng)前的一個研究熱點(diǎn)，而利用酶法降解麩皮制備低聚糖的方法所具有的無污染、低能耗等優(yōu)點(diǎn)將是麩皮資源開發(fā)利用的一個趨勢。
　　 本實(shí)驗(yàn)通過對里氏木霉的深入研究，得出其產(chǎn)酶的最佳條件，并

2、對酶進(jìn)行初步的分離純化，研究各個酶的酶學(xué)性質(zhì)，同時(shí)對小麥麩皮進(jìn)行必要的初處理，然后用里氏木霉產(chǎn)生的酶來降解處理后的麩皮，通過調(diào)節(jié)各種可能的影響因素，最大量的產(chǎn)生低聚糖。
　　 本實(shí)驗(yàn)室保藏的里氏木霉F0701是一種高產(chǎn)纖維素酶和半纖維酶的真菌，通過對該真菌的研究得出，在發(fā)酵過程中產(chǎn)生了纖維素酶系中的兩組酶系，即Cx酶、C1酶，沒有產(chǎn)生β-葡萄糖苷酶，另外還有木聚糖酶(Xylanase)；優(yōu)化獲得該菌株最佳產(chǎn)酶條件：碳源為2‰麩皮

3、、氮源為(NH4)2SO4，加入Tween20，培養(yǎng)液初始pH值4.5-5.0，在25-30℃下培養(yǎng)96-120h。
　　 然后對里氏木霉F0701發(fā)酵產(chǎn)生的降解酶進(jìn)行初步分離純化，并研究了它們的酶學(xué)性質(zhì)，得出Cx酶、C1酶和Xylanase三種酶的最適反應(yīng)溫度為70℃、50℃和50℃，最適反應(yīng)pH值分別為4.6、4.8和4.8，研究發(fā)現(xiàn)不同類型的無機(jī)離子對酶活有不同程度的影響，Cu2+、Mg2+、Fe2+對酶有促進(jìn)作用，Mn2

4、+、Tris、Ca2+對酶有明顯的抑制作用；通過雙倒數(shù)曲線法分別測出了三種酶的Km值，C1酶為27.92mg/ml，Cx酶為17.75mg/ml，Xylanase為25.59mg/ml。
　　 在對小麥麩皮進(jìn)行去除淀粉、去除蛋白質(zhì)等一些必要的處理后，用里氏木霉F0701所分泌的酶液對其進(jìn)行發(fā)酵降解，并運(yùn)用薄層色譜和高效液相色譜對產(chǎn)物進(jìn)行分析，然后對降解時(shí)的底物濃度、反應(yīng)時(shí)間、溫度和pH值等等多種因素加以考慮，以尋找酶解的最佳工藝