血清PCT水平、IL-10基因多態(tài)性與膿毒血癥的關(guān)系.pdf

1、目的：
　　 膿毒血癥是現(xiàn)今重癥監(jiān)護(hù)病房中常見的也是最嚴(yán)重的并發(fā)癥之一。感染導(dǎo)致膿毒癥以及合并MODS是危重患者主要的死亡原因。其已成為重癥醫(yī)學(xué)的首要問題，全球膿毒血癥死亡率28％左右，但不同年齡有所不同：兒童10％、成年人38％、老年則85％。我國目前缺乏詳細(xì)的臨床流行病學(xué)資料，但據(jù)推算，每年可能有300萬例患者發(fā)生膿毒血癥。本實(shí)驗(yàn)的目的是為了了解膿毒血癥患者血清PCT水平，依據(jù)血清中PCT水平確定膿毒血癥與全身炎癥反應(yīng)綜合征

2、判定的界限值，研究其與膿毒血癥預(yù)后的相關(guān)性；研究IL-10基因單核苷酸多態(tài)性(SNP)的-1082G/A、-592C/A位點(diǎn)基因頻率分布與膿毒血癥易感性的關(guān)系。揭示IL-10基因多態(tài)性與膿毒血癥關(guān)系，為其發(fā)病機(jī)制及預(yù)防研究提供科學(xué)依據(jù)，基因多態(tài)性研究將為我們深入剖析膿毒血癥的發(fā)病機(jī)制，探索疾病表型的多樣性，及其產(chǎn)生的本質(zhì)，發(fā)展更具個體化的臨床治療措施開辟一個新的途徑。
　　 方法：
　　 病例采用對照研究的方法，采集病例

3、組70例和正常對照組30例，依診斷標(biāo)準(zhǔn)分成膿毒血癥組、全身炎癥反應(yīng)綜合征組和對照組，清晨空腹取外周血，，測定血清降鈣素原(PCT)、C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)、白細(xì)胞(WBC)、中性粒細(xì)胞百分比(N)，血沉(ESR)水平，比較之間是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。取各組研究對象外周血白細(xì)胞，提取基因組DNA，采用擴(kuò)增阻滯突變系統(tǒng)聚合酶鏈反應(yīng)(ARMS-PCR)和擴(kuò)增限制性內(nèi)切酶長度多態(tài)性(PCR-RFLP)的方法，檢測

4、IL-10基因上-1082G/A、-592C/A位點(diǎn)基因型和等位基因，共兩個SNP的基因多態(tài)性。由此推斷膿毒血癥血清PCT水平判定的界值及與預(yù)后的相關(guān)性，為二者的診治提供指導(dǎo)性意見；研究IL-10基因啟動子區(qū)域中-1082G/A、-592C/A基因多態(tài)性與膿毒血癥及全身反應(yīng)綜合癥易感性。
　　 結(jié)果：
　　 1.健康組血清PCT均低于0.5ng/ml，SIRS組血清PCT水平有52.5％增高，增高濃度多在0.5-2.0

5、ng/ml，膿毒血癥組90％患者則明顯增高，其增高濃度多在2.0-10.0ng/ml；設(shè)PCT大于0.5ng/ml為陽性值，以膿毒血癥組患者的PCT值陽性率明顯高于SIRS組(P<0.05)，這一結(jié)果證明了PCT檢測的臨床意義。將患者血清PCT水平依據(jù)PCT>2 ng/ml分成兩組進(jìn)行比較。說明以PCT>2ng/ml為診斷膿毒血癥的標(biāo)準(zhǔn)，其陽性預(yù)測值為78.6％，敏感度(Pa)、特異度(Pd)及準(zhǔn)確性(CA)均較高，分別為73.3％，8

6、5％，80％，以PCT為依據(jù)診斷膿毒血癥的漏檢率僅為26.7％，誤診率也較低為15％。在臨床中應(yīng)用能較好的對膿毒血癥進(jìn)行診斷和判定；將膿毒血癥患者依據(jù)轉(zhuǎn)出重癥監(jiān)護(hù)病房或出院時病情明顯改善或改善為預(yù)后良好組，無改善或死亡為預(yù)后不良組。預(yù)后良好組86％的患者血清PCT值低于10.0ng/ml，預(yù)后不良組66.7％的患者血清PCT值大于10.0ng/ml，預(yù)后不良組APACⅡ評分明顯高于預(yù)后良好組，PCT水平對于評價(jià)膿毒血癥預(yù)后要優(yōu)于CRP、

7、WBC，高水平的血清PCT值不利于膿毒血癥預(yù)后的發(fā)展。
　　 2.IL-10-1082G/A基因型(GG、GA、AA)在膿毒血癥組、SIRS組和對照組的頻率分別為AA型70％、70％和80％、GA型23.3％、25.0％和16.7％、GG型6.7％、5.0％和3.3％；IL-10-592位點(diǎn)AA、CA、CC3種基因型頻率在膿毒血癥組、全身炎癥反應(yīng)綜合征組和對照組中分布為AA型70.0％、50％和40％、CA型20％、40％和33

8、.3％、CC型10％、10％和26.7％。等位基因(C、A)在三組的頻率分別為20％、30％、43.3％和80％、70％、56.7％；分析發(fā)現(xiàn)，IL-10基因組上SNP中在國人中出現(xiàn)的頻率不盡相同，與國外人群相比明顯不同，-1082A的頻率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他人群；-1082G/A基因型及A和G等位基因的頻率在膿毒血癥組、SIRS組和對照組三組間均無顯著性差異(P>0.05).膿毒血癥組-592AA基因型頻率與對照組比較，高于對照組，且差異有顯

9、著性意義(P<0.05)，-592C等位基因的頻率與對照組比較，明顯低于對照組，差異有極顯著性意義(P<0.05)。從而推斷膿毒血癥患者基因組中高頻率的-592AA基因型促使IL-10低水平分泌，雖然-592C相對于-592A為IL-10高表達(dá)型等位基因，但其表達(dá)頻率明顯低于健康人群，二者共同作用使膿毒血癥患者處于IL-10的低水平狀態(tài)，對促炎性細(xì)胞因子的釋放抑制作用相對較弱，炎性細(xì)胞因子的大量釋放，增大的患膿毒血癥的危險(xiǎn)性。所以IL-

10、10中-592AA基因型與膿毒血癥的發(fā)病相關(guān)。單體型AC膿毒血癥組、SIRS組和對照組三組間有顯著性差異(P<0.05)，明顯低于對照組，該單體型膿毒血癥組、SIRS組間有顯著性差異(P<0.05)；單體型AA膿毒血癥組、SIRS組和對照組比較有顯著性差異(P<0.05)，但二者之間無顯著性差異(P>0.05)。AA單體型膿毒血癥組明顯低于對照組，證實(shí)了ATA單倍型與IL-10產(chǎn)生減少有關(guān)。單體型AC也可能與膿毒血癥的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)性相關(guān)

11、r>　　 結(jié)論：
　　 1.PCT可作為早期全身炎癥反應(yīng)綜合征與膿毒血癥的快捷、敏感、準(zhǔn)確的檢測手段；PCT>2 ng/ml可作為診斷膿毒血癥的判定點(diǎn)，具有較高的陽性預(yù)測值、敏感度、特異度及準(zhǔn)確性；PCT水平可較好的判斷膿毒血癥預(yù)后，要優(yōu)于CRP和WBC，高PCT水平不利于膿毒血癥的預(yù)后發(fā)展。
　　 2.IL-10基因-1082G/A位點(diǎn)基因型及A和G等位基因與膿毒血癥易感性無關(guān)，IL-10-592AA基因型與膿毒血癥