蠶蛹腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑支持特性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)支持是醫(yī)院病人術(shù)前術(shù)后營(yíng)養(yǎng)支持的重要組成部分，是供給病人特殊營(yíng)養(yǎng)需求、促進(jìn)病人康復(fù)的重要手段之一。術(shù)后早期腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)支持主要目的是減輕營(yíng)養(yǎng)底物不足、防止細(xì)胞代謝紊亂、支持器官和組織的結(jié)構(gòu)與功能、參與機(jī)體調(diào)控免疫與生理功能、減少器官功能障礙的發(fā)生。術(shù)后后期腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)支持進(jìn)一步加速組織的修復(fù)和促進(jìn)病人的康復(fù)。近年來開始強(qiáng)調(diào)特異性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及其營(yíng)養(yǎng)效率，常添加特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)聯(lián)合應(yīng)用。禽流感和口蹄疫等禽畜類傳染病頻發(fā)帶來的禽畜傳統(tǒng)食品

2、原料的安全隱患，植物食品原料的氨基酸效價(jià)不高和功能成分有限的不足，開發(fā)動(dòng)物性和植物性EN制劑受到限制。利用有效安全的新型蛋白資源開發(fā)腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑是術(shù)前術(shù)后營(yíng)養(yǎng)食品的重要研究方向之一。
　　蠶蛹作為昆蟲蛋白資源，具有安全、高效、綠色、益生等特點(diǎn)，是膳食補(bǔ)充劑或食品添加劑或腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑的優(yōu)良原料，蠶蛹蛋白的相關(guān)高蛋白食品也日益受到人們的歡迎。但目前國(guó)外基本上沒有專門從蠶蛹蛋白綜合利用角度進(jìn)行的研究報(bào)道，我國(guó)也主要停留在蛋白的完全水解生

3、產(chǎn)氨基酸層面。
　　本文研究中選用的蠶蛹寡肽樣品（SPPS1，SPPS2）是褐色、略有土腥味、易吸潮的均勻粉末，易溶于水，分子量測(cè)定結(jié)果表明由3-7個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成。蠶蛹蛋白樣品（SPPS3）是灰白色、無味的均勻粉末，微溶于水，分子量測(cè)定結(jié)果表明由76-153個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成?；诓钍緬呙枇繜岱ǎ―SC）測(cè)定的熱穩(wěn)定性曲線計(jì)算 SPPS1、SPPS2、SPPS3的變性溫度分別為119.11℃、111.04℃、106.77℃?；诎?/p>

4、基酸分析儀測(cè)定SPPS1、SPPS2、SPPS3的氨基酸組成，含有18種氨基酸，谷氨酸（含谷氨酰胺）含量豐富，必需氨基酸占總氨基酸的比例分別是42.45％、45.18%和45.00%，必需氨基酸與非必需氨基酸質(zhì)量之比分別為0.82、0.74和0.82。氨基酸評(píng)分(AAS)、化學(xué)評(píng)分(CS)的計(jì)算結(jié)果表明蠶蛹寡肽和蠶蛹蛋白中的蛋氨酸含量很顯著的高于標(biāo)準(zhǔn)模式含量，而且必需氨基酸的組成合理，符合并優(yōu)于FAO/WHO模式。SPPS1、SPPS2

5、、SPPS3三種樣品的必需氨基酸指數(shù)（EAAI）均大于0.90。
　　本研究分析了蠶蛹寡肽和蠶蛹蛋白在模擬胃腸道消化過程中的消化特性和氮釋放量。在胃蛋白酶消化階段，SPPS1和SPPS2的必需氨基酸總數(shù)為400左右，顯著高于SPPS3的必需氨基酸數(shù)量50左右，而進(jìn)入胰蛋白酶消化階段時(shí)，三者的必需氨基酸總數(shù)接近，均達(dá)到400以上，蠶蛹寡肽和蠶蛹蛋白在體外模擬胃腸道消化試驗(yàn)中有超過90%的氮釋放量。蠶蛹寡肽和蠶蛹蛋白屬于腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑理

6、想的優(yōu)質(zhì)蛋白原料，可用于配制腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑。
　　本研究中以燙傷小鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模擬術(shù)前術(shù)后病人對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和能量的特殊需求，基于配方均衡設(shè)計(jì)原則，添加特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) L-精氨酸、花生四烯酸、?；撬?，蛋白質(zhì)來源于蠶蛹蛋白和蠶蛹寡肽，配制蠶蛹寡肽型和蠶蛹蛋白型腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)粉劑，并壓制成片劑。制得的片劑每100g供能478.69Kcal，能量構(gòu)成為蛋白質(zhì)19.80%、脂肪40.02%、碳水化合物39.57%。
　　將蠶蛹寡肽型和蠶蛹蛋白型腸

7、內(nèi)營(yíng)養(yǎng)片劑投與燙傷小鼠模型，從體內(nèi)免疫功能和炎癥反應(yīng)方面研究SPPS1、SPPS2、SPPS3對(duì)小鼠的營(yíng)養(yǎng)支持作用。將SPF級(jí)昆明種小鼠用5%TBSA致深Ⅱ度燙傷后隨機(jī)分為蠶蛹寡肽1腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑組（Silkworm Pupae Peptide1 Enteral Nutrition Preparations Group, S1ENP）、蠶蛹寡肽型腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑2組（Silkworm Pupae Peptide2 Enteral Nutrit

8、ion Preparations Group, S2ENP）、蠶蛹蛋白型腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑組（Silkworm Pupae Protein Enteral Nutrition Preparations Group, S3ENP組）、立適康對(duì)照組、空白組和對(duì)照組。將用SPPS1、SPPS2、SPPS3配制的腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑 S1ENP、S2ENP、S3ENP和立適康分別投與處理組，空白組和對(duì)照組投與普通鼠糧。每天觀察燙傷小鼠創(chuàng)面愈合情況，記錄皮膚結(jié)

9、痂時(shí)間和創(chuàng)面愈合時(shí)間，并記錄小鼠每日體重變化和存活率。燙傷小鼠2周后腹腔主動(dòng)脈取血，檢測(cè)血清總蛋白和白蛋白、血清免疫球蛋白、血清內(nèi)毒素、IL-6、TNF-α和T淋巴細(xì)胞總數(shù)及其亞群的濃度和數(shù)量。
　　燙傷小鼠2周后，S1ENP、S2ENP、S3ENP小鼠體重分別是33.12g、36.01g、33.84g，無顯著差異（P≥0.05），S2ENP、立適康組、對(duì)照組小鼠體重分別是36.01g、37.12g、37.63g，無顯著性差異（P

10、≥0.05）。S2ENP、立適康組的小鼠模型創(chuàng)面愈合情況良好，新生組織完整平坦。S1ENP組、S2ENP組、S3ENP組和立適康組的TP指標(biāo)值超過50g/L顯著高于對(duì)照組的TP值48.73 g/L（P＜0.05）；S2ENP組和立適康組Alb為30.08 g/L和30.17 g/L高于對(duì)照組Alb的27.62 g/L（P＜0.05）。SENP處理的三組IgA指標(biāo)值為59.14μ g/ml、55.70μ g/ml、58.04μ g/ml，

11、與立適康組的IgA值56.94μ g/ml均無顯著差異，且與對(duì)照組IgA59.90μ g/ml差異不顯著（P≥0.05）；IgM、IgG的指標(biāo)結(jié)果與IgA的結(jié)果分析類似，投與ENP的四組S1ENP組、S2ENP組、S3ENP組和立適康組無顯著性差異（P≥0.05）。ENP處理的S1ENP組、S2ENP組、S3ENP組和立適康組四組LPS指標(biāo)均顯著高于對(duì)照組0.12 EU/ml（P＜0.05）。S1ENP組、S2ENP組、S3ENP組和立

12、適康組四組TNF-α的濃度與對(duì)照組的2.71ng/ml比較無顯著差異（P≥0.05）；S1ENP、S2ENP組的IL-6分別為2.53 ng/ml和2.47 ng/ml與立適康組的2.34 ng/ml比較無顯著差異（P≥0.05），對(duì)照組的IL-6含量為2.05 ng/ml顯著低于其他組（P＜0.05）。S1ENP組、S2ENP組、S3ENP組的T淋巴細(xì)胞亞群各指標(biāo)值與立適康組均無顯著差異（P≥0.05）。本研究中配制得到的蠶蛹寡肽和蠶

13、蛹蛋白腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)片劑對(duì)燙傷小鼠的營(yíng)養(yǎng)支持作用與立適康有類似的效果，較好的促進(jìn)了燙傷小鼠創(chuàng)面的愈合情況。
　　由于嚴(yán)重創(chuàng)傷后機(jī)體易發(fā)生營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的合成代謝障礙，所以合理的提供充分的外源性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，能對(duì)機(jī)體的合成代謝產(chǎn)生積極的促進(jìn)作用，而腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)支持對(duì)全身炎癥反應(yīng)綜合征以及由此所致的多器官功能不全有明顯的防治效果。本文設(shè)計(jì)的蠶蛹寡肽型和蠶蛹蛋白型腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)制劑可促進(jìn)蛋白質(zhì)合成，改善燙傷后免疫功能的低下，降低內(nèi)毒素的移位，減輕燙傷后炎癥反應(yīng)，