已閱讀1頁，還剩70頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀
版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權，請進行舉報或認領
文檔簡介
1、本文實現(xiàn)了痤瘡丙酸桿菌脂肪酶的基因克隆表達，并對重組酶的酶學性質(zhì)和降解作用進行研究。從痤瘡丙酸桿菌基因組中克隆脂肪酶基因(liphy)，與pUCm-T載體連接，構建克隆載體pUCm-T-liphy。測序正確后，將liphy亞克隆至表達載體pET-15b連接，構建充足表達質(zhì)粒pET-15b-liphy，轉(zhuǎn)化到宿主菌BL21(DE3)PlysS后經(jīng)IPTG誘導表達，SDS-PAGE電泳結果顯示分子量約為37kDa的特異性條帶，但較多部分以包
2、涵體形式存在。優(yōu)化表達條件，確定最優(yōu)條件為:pH6.0，30℃培養(yǎng)，轉(zhuǎn)接量1∶60，IPTG終濃度0.4mM，誘導24h。采用Ni柱對表達產(chǎn)物進行純化，SDS-PAGE分析表明，純化后條帶單一，酶的純度達到95％以上，純化回收率為37.25％。酶學性質(zhì)研究表明，該酶反應的比活力為91.43U/ml，最適pH為9.5;最適溫度為30℃;具有一定的熱穩(wěn)定性。此外，Mg2+和Ca+對酶活有一定的促進作用，而Co2+、Fe3+、Cu2+、Zn2
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 脂肪酶基因的克隆表達及其酶學性質(zhì)研究.pdf
- 低溫脂肪酶生產(chǎn)菌篩選、基因克隆及其在大腸桿菌中的表達.pdf
- 脂肪酶的固定化及其在2-氯丙酸拆分中的應用.pdf
- 痤瘡丙酸桿菌
- 嗜熱脂肪地芽孢桿菌脂肪酶基因的克隆、表達及酶學性質(zhì)研究.pdf
- 24971.擴展青霉脂肪酶的高效原核表達與功能分析
- 27063.枯草桿菌脂肪酶基因分泌表達及其定點突變初步研究
- 46611.枯草桿菌脂肪酶a的表達及脂肪酶活力高通量測定的研究
- 少根根霉脂肪酶基因在枯草芽孢桿菌中的表達研究.pdf
- 深海嗜冷桿菌低溫脂肪酶基因的克隆表達、酶的純化及性質(zhì)研究.pdf
- 熒光假單胞菌26-2產(chǎn)脂肪酶條件優(yōu)化及其脂肪酶基因在畢赤酵母中的高效表達.pdf
- 位置非特異性脂肪酶產(chǎn)生菌的篩選及脂肪酶基因的表達.pdf
- 油菜脂肪酶基因的克隆及表達研究.pdf
- 產(chǎn)脂肪酶菌株Serratia marcescens Lipa1318的分離鑒定、發(fā)酵條件優(yōu)化及其脂肪酶基因的克隆表達.pdf
- 一株嗜熱芽孢桿菌脂肪酶基因的克隆表達以及重組酶酶學性質(zhì)和應用的研究.pdf
- RPL9基因的原核表達和脂肪細胞中的表達.pdf
- 40115.霉菌脂肪酶基因的克隆與表達
- 29345.粘質(zhì)沙雷氏菌脂肪酶在原核和真核系統(tǒng)中的克隆、表達及定性
- 原核表達系統(tǒng)的真核化及其在基因免疫中的應用.pdf
- 解淀粉芽孢桿菌SWB16脂肪酶基因的克隆、表達及活性檢測.pdf
評論
0/150
提交評論