豬肚菇多糖分離純化及生物活性研究.pdf

1、豬肚菇（Panus giganteus(Berk.) Corner），隸屬真菌門（Eumvcota）擔(dān)子菌綱（Basidiomycetes）多孔菌目（Polyporales）多孔菌科（Polyporaceae）革耳屬（Panus），是一種較常見的野生食用菌。豬肚菇具有很高的食藥用價(jià)值，其多糖作為豬肚菇中的主要活性物質(zhì)之一，對其研究目前報(bào)道較少。本論文以豬肚菇為研究對象，對豬肚菇多糖進(jìn)行分離純化，分析其結(jié)構(gòu)組分，并研究多糖的抑菌特性及體外

2、抗氧化活性，主要研究結(jié)果如下：
　?。?）除蛋白工藝采用蛋白酶和sevag法聯(lián)用，研究不同處理溫度，酶添加量，處理時(shí)間和pH值等因素對蛋白脫除率的影響，采用正交設(shè)計(jì)對工藝要素進(jìn)行優(yōu)化。豬肚菇多糖脫色采用大孔吸附樹脂，系統(tǒng)研究樹脂靜態(tài)吸附與動(dòng)態(tài)吸附試驗(yàn)。研究表明最佳脫蛋白工藝條件為：當(dāng)豬肚菇粗多糖溶液濃度為2mg/mL時(shí)，木瓜蛋白酶添加量1mg，酶解溫度為60℃，酶解pH為5.5，酶解時(shí)間5h，經(jīng)2次sevag法處理后的蛋白質(zhì)脫除率

3、為85.18％，多糖損失率為23.41%。確定最佳脫色工藝：NKA-9脫色樹脂，在靜態(tài)吸附條件時(shí)樹脂用量1：10，時(shí)間5h和溫度30℃，在動(dòng)態(tài)吸附條件時(shí)pH6，洗脫速率3BV∕h，豬肚菇的脫色率為84.19%，多糖損失率為20.79%。
　?。?）采用DEAE-52進(jìn)一步純化豬肚菇精多糖，并收集不同組分，后用SEC-MALLS-RI聯(lián)用技術(shù)、FT-IR分析法分別測定豬肚菇多糖分離所得組分的重均分子量、分子量分布、均方根半徑和空間結(jié)

4、構(gòu)等分子特征參數(shù)，分析每種組分的溶液構(gòu)象及多糖結(jié)構(gòu)。實(shí)驗(yàn)表明：豬肚菇多糖經(jīng)DEAE纖維素-52離子交換層析法得到PGP-1，PGP-2和PGP-3三個(gè)組分。將這三個(gè)組分進(jìn)行純度鑒定，結(jié)果表明三組分多糖較高，成分較均一。用SEC-MALLS-RI鑒定PGP-1，PGP-2和PGP-3三個(gè)組分的分子特性，結(jié)果表明三各組分的重均分子量、均方回旋半徑、分散度、分子形狀都存在著明顯著差異，這可能是多糖所帶電荷對其分子特性有較大的影響。PGP-1，

5、PGP-2和PGP-3的FT-IR結(jié)構(gòu)分析表明其為高支化的酸性多糖，其分子內(nèi)存在較強(qiáng)的相互作用。三個(gè)組分都含有不同的糖苷類型，其中PGP-1和PGP-2以吡喃糖苷為主。
　?。?）以豬肚菇粗多糖PGP和PGP-1為研究對象，研究豬肚菇多糖的抑菌活性。分別選取沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、假單胞桿菌、根霉、青霉和黑霉、綠木霉和啤酒酵母對豬肚菇多糖PGP、PGP-1進(jìn)行抑菌活性的研究。結(jié)果表明：豬肚菇多糖對金黃色葡

6、萄球菌、沙門氏菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、假單胞桿菌、根霉、青霉和綠木霉都有一定的抑制作用，對黑霉和啤酒酵母的抑制作用不明顯；豬肚菇多糖PGP的抑菌作用優(yōu)于豬肚菇精多糖PGP-1；豬肚菇多糖PGP對枯草芽孢桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和假單胞桿菌的最小抑菌質(zhì)量濃度分別為2.97mg/mL、5.94 mg/mL、23.75 mg/mL、11.88mg/mL、11.88 mg/mL。
　　（4）參照Vc，對豬肚菇粗多糖PG

7、P和PGP-1的體外抗氧化活性進(jìn)行了研究。結(jié)果表明：豬肚菇多糖PGP和PGP-1均具有一定的清除超氧陰離子自由基、羥自由基、DPPH自由基和總抗氧化的能力，而且與多糖的濃度呈正比，豬肚菇粗多糖PGP對自由基的清除能力優(yōu)于豬肚菇粗多糖PGP-1。濃度為2.0 mg/mL時(shí)，多糖PGP對上述四種自由基的清除能力分別為64.54U/mL、33.43 U/mL、11.92%、68.65 U/mL，而多糖PGP-1對上述四種自由基的清除能力分別為