流蘇石斛多糖分離純化、結(jié)構(gòu)分析及免疫活性的研究.pdf

1、流蘇石斛是一種蘭科石斛屬多年生草本植物，為《中國(guó)藥典》（2010版）收錄。本文對(duì)流蘇石斛多糖進(jìn)行了提取、分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定和免疫活性的研究。
　　干燥的流蘇石斛莖粉末脫色脫脂后，通過響應(yīng)面優(yōu)化法確定水溶性多糖WDFP的最佳提取條件為：溫度82°C，時(shí)間51min，液料比33.3:1，在此條件下WDFP的提取得率為9.68%。水溶性多糖提取后的殘?jiān)群筮M(jìn)行堿溶液提取和酸溶液提取，獲得堿溶性多糖BDFP和酸溶性多糖ADFP。WDFP經(jīng)

2、DEAE-Cellulose陰離子交換色譜柱分級(jí)得到五個(gè)組分：WDFP-1、WDFP-2、WDFP-3、WDFP-4和WDFP-5。經(jīng)葡聚糖凝膠滲透色譜，從WDFP-1中分離獲得3種均一性多糖WDFP-1a、WDFP-1b和WDFP-1c，其相對(duì)分子量約為2.4×104Da、1.5×104Da、和7.6×103Da；從WDFP-4中分離獲得1種均一性多糖WDFP-4a，其相對(duì)分子量約為2.3×106Da；從WDFP-5中分離獲得1種均一

3、性多糖WDFP-5a，其相對(duì)分子量約為1.9×106Da。
　　采用甲基化分析、紅外光譜分析、氣相色譜分析、氣質(zhì)聯(lián)用分析、核磁共振波譜分析等方法，對(duì)各均一多糖進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果表明：（1）WDFP-1a由葡萄糖和甘露糖構(gòu)成，摩爾比為2.41:1.00，其主鏈由1,4-linkedβ-D-Manp和1,4-linkedβ-D-Glcp構(gòu)成，在1,4-linkedβ-D-Manp的O-2/3位存在乙酰基；（2）WDFP-1b由葡萄糖

4、和甘露糖構(gòu)成，糖苷鍵類型主要有1,4-linkedGlcp、1,6-linkedManp、1,3,6-linkedManp和1-linkedGlcp，其摩爾比約為3.99:2.81:1.08:1.00；（3）WDFP-1c由葡萄糖和甘露糖構(gòu)成，糖苷鍵類型主要有1,4-linkedGlcp、1,6-linkedManp、1,3,6-linkedManp和1-linkedGlcp，其摩爾比約為4.05:3.19:1.13:1.00；（4）W

5、DFP-4a由半乳糖、葡萄糖和甘露糖構(gòu)成，糖苷鍵類型主要有1,6-linkedGalp、1,4-linkedGlcp、1,3,6-linkedManp和1-linkedGlcp，其摩爾比約為9.28:5.41:1.03:1.00；（5）WDFP-5a由半乳糖、葡萄糖和甘露糖構(gòu)成，糖苷鍵類型主要有1,6-linkedGalp、1,4-linkedGlcp、1,3,6-linkedManp、1,3,6-linkedGalp和1-linked