夾竹桃多糖分離、純化及抗腫瘤活性的研究.pdf

1、目的：本文研究夾竹桃多糖的分離、純化方法，抗腫瘤效果及其作用機(jī)制。 方法：采用水提醇沉法從夾竹桃葉提取粗多糖(NP)，NP經(jīng)過(guò)DEAE-Sephadex A-25分級(jí)，Sephadex G-100純化后得純多糖(NP3、NP4)，分別對(duì)其純度和部分理化性質(zhì)進(jìn)行鑒定。研究NP體內(nèi)對(duì)小鼠S180皮下移植瘤和S180腹水瘤生長(zhǎng)的抑制作用，采用免疫組化法檢測(cè)皮下移植瘤細(xì)胞中的PCNA、Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)，采用藥物相互作用指數(shù)研究

2、了NP與環(huán)磷酰胺聯(lián)用對(duì)S180皮下移植瘤抑制的協(xié)同作用。研究NP對(duì)正常小鼠巨噬細(xì)胞碳廓清能力、免疫器官指數(shù)和腹腔巨噬細(xì)胞吞噬活性的影響，檢測(cè)NP對(duì)ConA和LPS分別誘導(dǎo)正常小鼠脾臟T、B淋巴細(xì)胞的增殖影響。應(yīng)用MTT法研究純化后的多糖NP3、NP4分別對(duì)K562細(xì)胞增殖的抑制效果，細(xì)胞集落培養(yǎng)觀察NP3、NP4分別對(duì)K562中增殖細(xì)胞群的影響。 結(jié)果：經(jīng)提取得到的NP為淡黃色粉末狀物質(zhì)，得率為3.95％，NP的多糖含量為81.

3、14％，NP經(jīng)分離純化后得兩個(gè)多糖組分NP3和NP4。NP對(duì)小鼠S180移植瘤有明顯的抑制作用并且能顯著延長(zhǎng)腹水瘤小鼠的壽命，NP作用后移植瘤組織中表達(dá)PCNA、Bcl-2蛋白的細(xì)胞陽(yáng)性率明顯降低，表達(dá)Bax蛋白的細(xì)胞陽(yáng)性率明顯升高，NP100 mg/kg與CTX10 mg/kg組聯(lián)用具有協(xié)同作用。NP能顯著增強(qiáng)正常小鼠巨噬細(xì)胞的碳廓清能力，明顯提高胸腺及脾的臟器指數(shù)，顯著增強(qiáng)腹腔巨噬細(xì)胞吞噬活性，明顯促進(jìn)ConA和LPS分別誘導(dǎo)的小鼠