產(chǎn)氨基葡萄糖工程菌的構(gòu)建與發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf

1、氨基葡萄糖(GlcN)又被稱為氨基葡糖或者葡糖胺，它是葡萄糖2號位 C上羥基被氨基取代后的化合物，在很多領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用，尤其是在醫(yī)藥領(lǐng)域和保健領(lǐng)域。氨基葡萄糖傳統(tǒng)生產(chǎn)方法主要采取酸解幾丁質(zhì)法，受原料限制產(chǎn)量低，污染比較嚴重，并且不適合個別過敏人群。采用微生物發(fā)酵法替代酸解法是目前研究的熱點。
　　本文介紹一種構(gòu)建基因工程菌產(chǎn)氨基葡萄糖的方法，通過大腸桿菌中產(chǎn)氨基葡萄糖的代謝途徑分析，找到了代謝途徑中的兩個關(guān)鍵酶氨基葡萄糖合酶和

2、氨基葡萄糖乙?；?，通過將枯草芽孢桿菌中的氨基葡萄糖合成酶基因（Glms）和釀酒酵母中的氨基葡萄糖乙?；颍╣naI）基因，共同導入到大腸桿菌中，讓其在大腸桿菌中的高效表達生產(chǎn)氨基葡萄糖和乙酰氨基葡萄糖，乙酰氨基葡萄糖經(jīng)過弱酸處理得到氨基葡萄糖。構(gòu)建好的基因工程菌和原始菌對比，氨基葡萄糖合成酶蛋白和乙?；傅鞍妆磉_量有了明顯的提高。
　　通過搖瓶發(fā)酵優(yōu)化，重組菌的胞內(nèi)和胞外氨基葡萄糖在16h時達到最高值，分別為0.637g/L和