久效磷單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株建立及性質(zhì)鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、久效磷(C7H14NO5P)是一種應(yīng)用廣泛有機磷農(nóng)藥,對哺乳動物、魚類、鳥類等廣泛的生物都具有強的毒性作用。因此,建立一種快速、簡便、費用低廉的檢測久效磷在糧食、蔬菜、水果中的殘留量的方法是十分必要的。目前檢測主要方法是色譜技術(shù),費時費力,而免疫測定技術(shù)(ELISA)卻有著靈敏、高效,同時檢測大批量樣品的的優(yōu)點,最近幾年得到很快的發(fā)展。 雖然最近幾年應(yīng)用單克隆抗體用于農(nóng)藥殘留檢測有許多報道,但國內(nèi)外尚未發(fā)現(xiàn)ELISA法檢測久效磷

2、殘留的相關(guān)研究。 本研究利用戊二醛法合成了久效磷人工抗原,用紫外光譜法、SDS-PAGE鑒定合成成功,并用定磷法測得Mcp免疫原(Mcp-OVA)中Mcp與OVA的結(jié)合比為25:1,包被原(Mcp-BSA)中Mcp與BSA的結(jié)合比為19:1。Mcp-OVA免疫老鼠,通過抗血清ELISA方陣滴定曲線確定,最適包被濃度0.5μg/mL,最佳抗體工作濃度為4000×稀釋的抗血清。通過間接抑制ELISA曲線得知抑制率為50%時Mcp的檢

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