分泌抗磺胺類藥物單克隆抗體雜交瘤株的建立.pdf

1、磺胺類藥物（SAs）是畜牧業(yè)生產(chǎn)上廣泛應用的一類化學合成抗菌藥，其具有性質(zhì)穩(wěn)定，易于保存以及副作用低等優(yōu)點。然而過量該類藥物使用會引起人的過敏性反應，且有可能致癌?；前奉愃幬镌趧游镄允称分袣埩粢鸬纳鷳B(tài)環(huán)境污染和人類健康危害已倍受關注，因此許多國家對磺胺類藥物最高殘留量（MRL）均做了明確的規(guī)定。
　　目前用于磺胺類藥物殘留的檢測方法很多，如氣相色譜法（GC）和質(zhì)譜法（MS）、高效液相色譜法（HPLC）等多種理化方法。雖然這些方法

2、靈敏，準確，但是樣品前處理步驟繁瑣，花費時間長，費用高，限制了它的廣泛使用。因此研究開發(fā)一種快速簡便的磺胺類藥物殘留檢測技術已迫在眉睫。酶聯(lián)免疫吸附檢測法（ELISA）以及膠體金免疫層析技術（GICA）具有快速、簡便、特異性好和靈敏度較高等優(yōu)點，是藥物殘留檢測的一種有效方法。
　　本研究的目的是建立分泌抗磺胺類藥物單克隆抗體雜交瘤株，為建立磺胺類藥物免疫學檢測方法基礎材料。
　　本研究采用化學方法合成3種具有磺胺類藥物母核結(jié)

3、構(gòu)的半抗原，并通過核磁共振儀以及液-質(zhì)聯(lián)用來鑒定為預期產(chǎn)物。用重氮化法將3種合成半抗原以及5種磺胺類藥物（磺胺胍、磺胺噻唑、磺胺嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑）與牛血清白蛋白和卵清白蛋白偶聯(lián)，用紫外光譜、紅外光譜鑒定偶聯(lián)成功。
　　用偶聯(lián)的完全抗原免疫BALB/c雌性小鼠6~7次，用雙向瓊脂擴散法以及間接ELISA方法檢測血清效價，當間接ELISA效價達到1:6400以上時，取高效價的小鼠脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞進行細胞融合