菜籽多糖酸法提取及其抗氧化活性研究.pdf

1、菜籽餅粕是油菜籽經(jīng)榨油加工后的副產(chǎn)品總稱。長期以來,由于人們對(duì)于菜籽餅粕中的成分研究不夠深入,因此主要將其作為部分飼用蛋白替代物或肥料使用。近年來,由于對(duì)膜的化學(xué)功能、免疫物質(zhì)及新藥物資源等研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)多糖在生物體內(nèi)不僅作為能量資源或結(jié)構(gòu)材料,更重要的是還參與了生命現(xiàn)象中細(xì)胞的各種活動(dòng),具有多種多樣的生物學(xué)功能。為此,本文對(duì)菜籽多糖的提取、分離純化及抗氧化活性方面進(jìn)行了研究,期望為菜籽餅粕中的多糖成分利用提供一定的資料。主要結(jié)論

2、如下:
　　 1、本實(shí)驗(yàn)利用響應(yīng)面分析法對(duì)菜籽多糖的酸法提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選取酸濃度、料液比、提取時(shí)間、提取溫度進(jìn)行了4因素3水平的Box-Behnken中心組合研究,并運(yùn)用DesignExpert7.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。建立了以上4個(gè)主要因素對(duì)酸提菜籽多糖得率影響的數(shù)學(xué)模型,并通過響應(yīng)面分析法對(duì)提取條件進(jìn)行了優(yōu)化,確定了酸法提取菜籽多糖的最佳工藝。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,各提取因素對(duì)酸提菜籽多糖得率的影響順序

3、為:提取溫度＞酸濃度＞提取時(shí)間＞料液比。所得最佳提取條件為:酸濃度0.28mol/L、料液比43.05mL/g、提取時(shí)間5h和提取溫度71.9℃,在此條件下預(yù)期的多糖得率是4.07％,實(shí)際得率為4.01％。
　　 2、離子交換色譜法和凝膠排阻色譜法是兩種常用的多糖分離方法。本實(shí)驗(yàn)即是利用以上兩種方法進(jìn)行菜籽多糖的分離純化。選用DEAE-SephadexA-25和SephadexG-100對(duì)菜籽粗多糖進(jìn)行逐級(jí)純化,純化效果顯著,最

4、終得到RSP-1-1組分。最后,通過SephadexG-100凝膠柱層析和濾紙電泳試驗(yàn)表明菜籽多糖RSP-1-1是分子量分布相對(duì)均一的多糖。經(jīng)測定菜籽多糖RSP-1-1中中性糖含量為68.4％,蛋白質(zhì)含量為4.6％,糖醛酸含量19.7％。
　　 3、對(duì)于抗氧化性的研究,本實(shí)驗(yàn)選擇了四種常見的體外抗氧化活性測試方法,分別是:還原能力測定、超氧陰離子自由基清除能力測定、羥基自由基清除能力測定以及DPPH自由基清除能力測定。測試的對(duì)象

5、為酸提菜籽粗多糖RSP（粗）和分離純化后所得較均一級(jí)分RSP-1-1。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,酸法提取的菜籽多糖各級(jí)分均具有一定的清除羥自由基、DPPH自由基的能力及還原能力。同時(shí),通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),兩種菜籽多糖級(jí)分對(duì)于超氧陰離子自由基的清除幾乎沒有作用。當(dāng)多糖濃度為2mg/mL時(shí),RSP（粗）對(duì)DPPH自由基清除能力能達(dá)到49.9％,RSP-1-1的清除能力能達(dá)到26.7％:當(dāng)多糖濃度為4mg/mL時(shí),RSP（粗）對(duì)羥基自由基的清除能力能達(dá)到30.