定向酶解大豆蛋白及其ACE抑制肽研究.pdf

1、通過SWISS-PROT，GSC等蛋白序列數(shù)據(jù)庫網(wǎng)站的查詢，獲得大豆蛋白、大豆7S球蛋白及11S球蛋白的氨基酸序列，補充到蛋白質數(shù)據(jù)庫，搜索近年來國內外發(fā)表的關于ACE抑制肽的文獻，更新ACE抑制肽數(shù)據(jù)庫，以及從酶命名數(shù)據(jù)庫中搜索、完善了更多的蛋白酶到蛋白酶數(shù)據(jù)庫，并利用VisualBasic在“定向酶解制備活性肽分析系統(tǒng)”中添加疏水性氨基酸含量計算程序、雙酶水解程序、預測潛在活性肽程序和水解片段分子量計算程序。 利用疏水性氨基

2、酸含量計算程序分析大豆蛋白、大豆7S和11S球蛋白，初步篩選合適的蛋白質，再結合“定向酶解制備活性肽分析系統(tǒng)”模擬水解，以水解出的活性肽段相對較多的堿性蛋白酶以及胃蛋白酶+胰蛋白酶對大豆分離蛋白以及大豆7S球蛋白進行水解。 實驗比較堿性蛋白酶與胃蛋白酶+胰蛋白酶水解大豆分離蛋白與大豆7S球蛋白水解產(chǎn)物ACE抑制活性的大小，結果顯示，堿性蛋白酶水解物ACE抑制活性較胃蛋白酶+胰蛋白酶高，大豆分離蛋白與大豆7S球蛋白水解產(chǎn)物的ACE

3、抑制活性相當。以大豆7S球蛋白的堿性蛋白酶水解產(chǎn)物做分子量分布，其重均分子量分布與模擬水解產(chǎn)物的重均分子量進行相關性分析，結果線性關系顯著，相關性較好。 以75％乙醇為洗脫液，采用DA201-C型大孔吸附樹脂對水解液進行疏水性氨基酸的富集，產(chǎn)物疏水性提高2.26％，富集產(chǎn)物以200mg/mL的濃度，1.0mL的上樣量，0.25mL/min的流速，0.02mol/LHAc-NaAc緩沖液(pH4.0)通過SephadexG-15分