酶解馬鈴薯蛋白及其飼喂效果研究.pdf

1、研究胃蛋白酶和胰蛋白酶體外酶解馬鈴薯蛋白的最適酶解參數(shù)。在此基礎(chǔ)上，通過考察酶解產(chǎn)物對斷奶仔豬生產(chǎn)性能、腸道形態(tài)與發(fā)育、血液指標(biāo)的影響評價(jià)其在斷奶仔豬上的飼喂效果。 試驗(yàn)一：蛋白酶體外酶解馬鈴薯蛋白適宜酶解參數(shù)研究 為了確定胃蛋白酶和胰蛋白酶體外酶解馬鈴薯蛋白的最適酶解參數(shù)。先做溫度梯度試驗(yàn)確定胃蛋白酶和胰蛋白酶酶解馬鈴薯蛋白的最適酶解溫度（溫度梯度設(shè)為40、45、50、55℃）；再通過L9（34）不完全正交試驗(yàn)分別確定

2、兩種酶對馬鈴薯蛋白的最適反應(yīng)條件（胃蛋白酶初始pH設(shè)為0．8/1．8/2．8三個(gè)水平、酶濃度設(shè)為1000/3000/5000U/g原料三個(gè)水平；胰蛋白酶初始pH設(shè)為7．0/8．0/9．0三個(gè)水平、酶濃度設(shè)為200/350/500U/g原料三個(gè)水平，兩種酶的反應(yīng)時(shí)間均設(shè)為15/25/35h三個(gè)水平）；最后進(jìn)行雙酶聯(lián)合水解研究（先用胃蛋白酶處理或先用胰蛋白酶處理，胃蛋白酶的用量始終被固定在2000U/g底物，胰蛋白酶的用量分別被設(shè)為最佳酶濃

3、度的1/4、1/2、3/4）。試驗(yàn)結(jié)果顯示胃蛋白酶和胰蛋白酶單酶酶解馬鈴薯蛋白的最優(yōu)條件分別是仞始pH=1．8和9．0、溫度為50和45℃、酶濃度為5000和500U/g底物、反應(yīng)時(shí)間均為35小時(shí)。聯(lián)合酶解最優(yōu)條件為：先用胰蛋白酶在初始pH=9．0、溫度為45℃、酶濃度為250U/g原料的條件下酶解20h，再用胃蛋白酶在pH=1．8、溫度為50℃、酶濃度為2000U/g原料的條件下酶解15h，加堿調(diào)pH至中性可得最終產(chǎn)品。測得產(chǎn)品水解度

4、為9．86％，TCA-NSI為49．28％，Gln得率為86．39％，分子量小于1kDa的肽中Gln含量為1．73％，分子量大于1kDa小于0．45μm的肽中Gln含量為4．12％，肽中Gln總含量為5．85％，未檢測到還原糖。 試驗(yàn)二：馬鈴薯蛋白體外酶解產(chǎn)物在斷奶仔豬上的飼喂效果研究 在試驗(yàn)一的基礎(chǔ)上，為了評價(jià)酶解馬鈴薯蛋白在斷奶仔豬上的飼喂價(jià)值，試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選擇26±2日齡初始體重7．38±0．66kg斷

5、奶仔豬28頭，分到4個(gè)處理組中，每個(gè)處理7個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭豬。用5％未酶解馬鈴薯蛋白、5％酶解馬鈴薯蛋白和5％血漿蛋白等能等氮代替對照日糧中的豆粕。試驗(yàn)期14天，分別在試驗(yàn)第1、8、15天清晨空腹稱重后采血10ml；第15天，每個(gè)處理選擇6頭仔豬放血?dú)⒇i取腸道組織切片樣和腸道粘膜樣。試驗(yàn)結(jié)果表明： ①酶解組較對照組和未酶解組能提高第一周ADG、ADFI，并降低F/G，其中酶解組第一周ADG顯著高于對照組（P<0．05）。在第

6、二周和全期，酶解組、對照組和未酶解組的生產(chǎn)性能相當(dāng)，差異不顯著（P>0．05）。血漿蛋白組在各個(gè)階段都能顯著或極顯著提高仔豬ADFI、ADG，并降低F/G（P<0．05或P<0．01）。 ②與其它所有處理組相比，酶解組都能顯著或極顯著提高小腸各腸段絨毛高度（P<0．05或P<0．01），極顯著降低各腸段粘膜隱窩深度（P<0．01）。 ③與其它所有處理組相比，酶解組都顯著提高空腸和回腸粘膜中蛋白質(zhì)含量（P<0．05）；酶解

7、組較對照組和血漿蛋白組能顯著或極顯著提高腸粘膜DNA濃度；雖然酶解組也有提高腸道RNA濃度的趨勢，但各處理組之間差異不顯著（P>0．05）。 ④酶解組較其它所有處理組都能極顯著提高腸粘膜SIgA含量（P<0．01），但腸粘膜Gln含量的差異并不顯著（P>0．05）。 ⑤與對照組和血漿蛋白組相比，酶解組和未酶解組（特別是酶解組）都能顯著或極顯著提高血清總蛋白含量、球蛋白含量、血清Glu含量，降低血清A/G；也提高了血清尿素