生物熒光分析試劑Cy5的合成及薯蕷皂素酶解法提取工藝的研究.pdf

1、該論文首先綜述了Cy系列試劑在生物熒光分析中作為分子燈標(biāo)和在蛋白質(zhì)組學(xué)中的應(yīng)用原理,在分子燈標(biāo)中,Cy系列作為熒光基團(tuán)標(biāo)記在一段寡聚核苷酸序列的一端,在另一端標(biāo)記熒光淬滅基團(tuán),當(dāng)在原性狀態(tài)下呈環(huán)-莖結(jié)構(gòu),熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)相互靠近,發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移而無熒光,當(dāng)核苷酸與靶基因特異性結(jié)合后會(huì)發(fā)出熒光可用來檢測(cè).而在蛋白質(zhì)組學(xué)中,Cy系列與蛋白質(zhì)結(jié)合,通過一定的分離手段分離后,利用熒光可檢測(cè),從而研究蛋白質(zhì)組的一系列性質(zhì).接下來列舉了一系

2、列的具體實(shí)例,闡述了Cy系列在生物分析中的廣泛應(yīng)用.此外還對(duì)Cy系列試劑在其他領(lǐng)域的應(yīng)用作了簡(jiǎn)單的介紹.最后,鑒于菁染料的廣泛用途和應(yīng)用前景,我們以Cy5為例探討生物熒光分析試劑Cy系列的合成研究.我們從最基本的原料對(duì)氨基苯磺酸開始,經(jīng)過重氮化反應(yīng),吲哚環(huán)的成環(huán)反應(yīng),親核取代反應(yīng),縮合反應(yīng)等五步反應(yīng)得到了制備Cy5的兩個(gè)原料:1-乙基-2,3,3-三甲基吲哚-5-磺酸鹽和1-(ε-羧戊基)-2,3,3-三甲基吲哚-5-磺酸鹽.并利用縮合

3、劑β-苯胺基丙烯醛縮苯胺鹽酸鹽對(duì)二者進(jìn)行了初步的交聯(lián),得到了一些進(jìn)行Cy5合成的重要條件.為了使人工栽培黃姜為原料生產(chǎn)薯蕷皂素的收率得以提高,該文的第二部分采用正交實(shí)驗(yàn)的方法研究了以人工栽培黃姜為原料利用酶解法的提取工藝,最終得到最佳工藝為:150g黃姜在350mL水、3.OmL淀粉酶、40℃下酶解12小時(shí).水解后再用石油醚提取薯蕷皂素,收率可達(dá)2.37％,與直接酸水解法的得率1.84％相比有較大幅度的提高,這將為實(shí)際生產(chǎn)提供有價(jià)值的指