黃姜中薯蕷皂苷的提取純化及酶解工藝研究.pdf

1、黃姜(Dioscorea zingiberensis C.H.Wright)是生產(chǎn)甾體激素類藥物的主要藥源植物，是我國的特有種。黃姜的塊莖中含有豐富的薯蕷皂苷，為其主要活性成分，其水解產(chǎn)物薯蕷皂苷元是合成甾體激素類藥物和甾體避孕藥的基礎原料和起始中間體，以其為基礎可以合成180多種激素類藥物，具有很高的藥用價值。目前，國內(nèi)提取薯蕷皂苷元大多采用的生產(chǎn)工藝是傳統(tǒng)的預發(fā)酵-酸水解法，此方法污染嚴重，原料綜合利用率較低。
　　 本文以

2、黃姜為原料，研究了超聲波-表面活性劑技術提取黃姜中的薯蕷皂苷的工藝條件及大孔吸附樹脂對薯蕷皂苷分離純化效果的影響，并用酶水解代替?zhèn)鹘y(tǒng)的酸水解來降解薯蕷皂苷以提取薯蕷皂苷元，采用薄層色譜、熔點測定、紅外光譜、高效液相色譜等一系列手段對其進行了表征，旨為薯蕷皂苷元的工業(yè)化生產(chǎn)提供理論基礎。研究結果如下：
　　 (1)以黃姜為原料，利用超聲波-表面活性劑提取黃姜中的薯蕷皂苷，研究比較了7種表面活性劑對薯蕷皂苷增溶效果的影響及提取料液比

3、、超聲頻率、時間、表面活性劑濃度對薯蕷皂苷得率的影響，并通過單因素及正交試驗確定了最佳的工藝條件。結果表明，十二烷基硫酸鈉的增溶效果較好，最佳提取工藝為：黃姜粉末：十二烷基硫酸鈉水溶液）料液比1∶14，表面活性劑濃度為6.8×10-3mol/L（cmc，即臨界膠團濃度），超聲頻率25.8KHz，超聲時間40min，薯蕷皂苷得率達到6.50％，比水提法提高了3.33％，具有一定的應用價值。
　　 (2)采用大孔吸附樹脂對薯蕷皂苷提

4、取液進行分離純化，通過靜態(tài)及動態(tài)吸附試驗研究比較了5種大孔吸附樹脂的分離純化效果，并對其純化工藝條件進行了優(yōu)化，得到最佳工藝參數(shù)為：以提取液濃度為上樣濃度，采用D101大孔吸附樹脂，將上樣溶液以1BV/h的吸附流速吸附，用70％乙醇以3BV/h的流速洗脫，得到的薯蕷皂苷純度可達74％，樹脂重復使用次數(shù)為4次。
　　 (3)以純化的薯蕷皂苷為原料，研究比較了5種水解酶對薯蕷皂苷的降解效果及吐溫-80解除殘留乙醇對酶的抑制作用，并通

5、過單因素及正交試驗探討了酶解各因素對薯蕷皂苷元得率的影響，結果表明，β-葡聚糖酶的水解效果最好，吐溫-80能夠明顯減少殘留乙醇對β-葡聚糖酶的抑制作用使其酶活力提高了63％。最佳的酶解工藝參數(shù)：酶用量為0.15g，最適pH值為5.5，溫度為55℃，時間20h，薯蕷皂苷元得率達2.031％。
　　 (4)通過薄層色譜、熔點測定、紅外光譜、高效液相色譜等方法對產(chǎn)品進行表征，結果證實從黃姜中提取出的產(chǎn)品為薯蕷皂苷元，純度達91.4％，