抗菌肽接枝絲素蛋白膜的制備表征及細(xì)胞毒性測試.pdf

1、桑蠶絲素蛋白由于其優(yōu)越的力學(xué)性能、良好的生物相容性和生物可降解性，被人們視為生物材料的理想材料?；诮z素蛋白為基質(zhì)的材料在生物或醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用研究紛紛涌現(xiàn)，比如絲素蛋白納米纖維、絲素膜、絲素三維支架在細(xì)胞培養(yǎng)和生長因子傳輸?shù)确矫娴膽?yīng)用。更為重要的是，很多研究者致力于研究如何改進(jìn)基于絲素蛋白的生物材料，通過提高其某一方面的性能以用于特殊的用途。然而，在生物醫(yī)用材料的臨床應(yīng)用中，由生物材料引發(fā)的感染(biomaterialcenteredi

2、nfection，BCI)是其發(fā)展的一大障礙。為了避免植入材料引起的感染，人們在生物材料表面處理方面做了很多研究。抗菌肽是由生物細(xì)胞特定基因編碼的一類小分子多肽，是宿主防御病源微生物入侵的重要分子屏障，其生成和釋放是機(jī)體炎癥反應(yīng)的組成部分。CecropinB是一類存在于昆蟲血淋巴的抗菌短肽，它們表現(xiàn)出強(qiáng)烈的陽性特性，且為兩親性分子，結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)α-螺旋狀。CecropinB抗菌肽不僅具有抗革蘭氏陽性細(xì)菌的作用，并且有抗革蘭氏陰性細(xì)菌的作用。

3、 本研究通過碳二亞胺法將序列為(NH2)-NGIVKAGPAIAVLGEAAL-PCONH2的CecropinB抗菌肽共價接枝到桑蠶絲素膜表面，以制備一種具有抗菌性能的絲素膜。為了避免薄膜在接枝過程中溶解，我們用不同濃度的乙醇溶液處理絲素膜，以使絲素的結(jié)構(gòu)由不穩(wěn)定的絲素結(jié)構(gòu)Ⅰ轉(zhuǎn)變?yōu)榻z素結(jié)構(gòu)Ⅱ。我們對制備工藝進(jìn)行了優(yōu)化探討，發(fā)現(xiàn)抗菌絲素膜在抗菌肽濃度為0.1mg/mL，接枝時間為2h，且接枝pH為6.5或8時，有良好的抗菌性能；并

4、且我們利用紅外光譜、掃描電鏡、X-射線能譜、原子力顯微鏡、接觸角測試、X射線光電子能譜和抗菌測試等手段對制得的絲素膜結(jié)構(gòu)、表面特性及其抗菌性能進(jìn)行了測試分析。紅外光譜結(jié)果表明抗菌絲素膜二級結(jié)構(gòu)是不溶性的B片層結(jié)構(gòu)；原子力顯微鏡結(jié)果表明抗菌絲素膜表面粗糙度隨著抗菌肽CecropinB的接枝而不斷增加；接觸角測試表明抗菌絲素膜在抗菌肽CecropinB接枝后表現(xiàn)出較好的親水性，而良好的親水性是細(xì)胞黏附和增殖所必須的；元素成分分析和抗菌持久性