人體尿液中多環(huán)芳烴煙氣暴露生物標(biāo)志物的分析研究.pdf

1、作為煙氣中的有害成分，多環(huán)芳烴越來越多的受到流行病學(xué)和吸煙與健康關(guān)系研究的關(guān)注。生物標(biāo)志物法可以人體尿液中的多環(huán)芳烴羥基代謝物來評(píng)估人體所處吸煙環(huán)境中多環(huán)芳烴的暴露狀態(tài)。因此，建立準(zhǔn)確分析人體尿液中多環(huán)芳烴羥基代謝物的方法具有重要意義。本論文以此為目標(biāo)，建立了三種方法，并對(duì)衍生化手段進(jìn)行了初步的探索，具體內(nèi)容如下：
　　 一、考察了固相萃取柱、色譜柱和質(zhì)譜條件對(duì)分析結(jié)果的影響，建立了測(cè)定尿液中11種多環(huán)芳烴生物標(biāo)志物的固相萃取一

2、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜方法(LC-MS/MS)。以1．羥基芘一d9（1-OHPyr-d9）、3一羥基菲一d9（3-OHPhe-d9）和1一羥基萘一d8（1-OHNap-d8）為內(nèi)標(biāo)，通過β-葡糖苷酸／芳基硫酸酯酶酶解、BondElutC18小柱固相萃取、AgilentZORBAXEclipsePAH色譜柱分離和多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式(MRM)質(zhì)譜檢測(cè)了尿液中多環(huán)芳烴的羥基代謝物(OHPAHs)。結(jié)果表明，OHPAHs的定量限為6～130pg/mL，r

3、為0.9991～1.0000，加標(biāo)回收率為72.5％-124.5％，日內(nèi)精密度為1.5％-7.4％，日間精密度為2.9％～12.0％。該方法適用于尿液中多環(huán)芳烴生物標(biāo)志物的分析。
　　 二、考察了攪拌吸附萃取棒萃取時(shí)間和樣品pH值對(duì)攪拌吸附萃取效果的影響，建立了攪拌吸附萃取—液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜對(duì)人體尿液中11種多環(huán)芳烴生物標(biāo)志物檢測(cè)的方法。結(jié)果證明，該方法的日內(nèi)精密度為3.1％～9.3％，日間精密度為3.3％～11.3％，回收率為

4、7l.g％_126.7％。該方法大大節(jié)省了分析工作者的時(shí)間和精力，提高了樣品處理通量，也減少了有機(jī)試劑耗費(fèi)，對(duì)于實(shí)現(xiàn)綠色化學(xué)有重要意義。
　　 三、比較了BondElutC18固相萃取柱和SupeIMIPTMSPE-PAHs分子印跡柱對(duì)人體尿液中多種多環(huán)芳烴生物標(biāo)志物的萃取凈化效果，建立了分子印跡一液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)人體尿液中多環(huán)芳烴生物標(biāo)志物的方法；對(duì)7名吸煙者與5名非吸煙者尿液中多環(huán)芳烴的生物標(biāo)志物含量進(jìn)行了檢測(cè)分析。結(jié)果

5、表明，SupeIMIPTMSPE-PAHs分子印跡柱的應(yīng)用不僅降低了尿樣的基質(zhì)效應(yīng)，而且顯著提高了目標(biāo)物的檢測(cè)靈敏度，其檢測(cè)限降低至1-5pg/mL。該方法的日內(nèi)精密度為1.4％～9.3％，日間精密度為5.2％-19.7％，回收率為72.0％-129.1％。通過對(duì)吸煙者與非吸煙者尿樣的分析，發(fā)現(xiàn)1．羥基萘、2一羥基萘和3一羥基芴與人體煙氣的暴露量有明顯相關(guān)，其在吸煙者尿樣中的濃度高于非吸煙者數(shù)倍至數(shù)十倍。該方法靈敏度高，分析時(shí)間短，適于