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文檔簡介
1、目的:神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、S100b、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)是目前研究較多的缺血缺氧性腦損傷的標記物,NSE特異性定位在神經(jīng)元內(nèi),GFAP、S100b主要集中在星形膠質(zhì)細胞內(nèi)。在圍產(chǎn)醫(yī)學(xué),主要通過測定羊水、臍血、新生兒血和新生兒腦脊液中這些指標來預(yù)測圍產(chǎn)兒腦損傷,國外有研究發(fā)現(xiàn)S100b和NSE的表達不僅局限于神經(jīng)系統(tǒng),胎盤組織也有相應(yīng)表達。因此臍血和羊水中S100b和NSE的活性是來自于腦損傷還是來自于胎盤或臍帶組織
2、的釋放?人們對此提出質(zhì)疑。S100b、NSE和GFAP究竟在胎盤或臍帶組織中呈怎樣的表達?不同孕周的變化趨勢如何?國內(nèi)外均未見系統(tǒng)研究報道。研究通過系統(tǒng)評價30名不同孕齡的健康產(chǎn)婦胎盤和臍帶組織S100b、NSE和GFAP的免疫活性,探討哪種指標更有希望成為圍產(chǎn)兒缺血缺氧性腦損傷的標記物。 材料和方法: 1、試劑 NSE、S100b、GFAP一抗、免疫組化試劑盒均由邁新試劑公司提供。 2、標本來源 組織來
3、自于30名不同孕齡健康產(chǎn)婦的胎盤和臍帶(采集標本事先已得到患者和家屬的同意),其中28周以下的來自于10個因為胎兒和母體原因流產(chǎn)的產(chǎn)婦,28-36周的來自于10個早產(chǎn)的產(chǎn)婦,36周以上的來自于10名自然分娩的產(chǎn)婦。多胎妊娠、胎兒腦畸形、21三體綜合癥及感染的除外。分娩后,立刻取胎盤中心的小葉和胎兒側(cè)臍帶組織,并固定在10%多聚甲醛待檢。 3、方法 胎盤或臍帶組織S100b、NSE和GFAP的檢測用免疫組化S-P法,以邁新
4、公司提供的陽性對照片為陽性對照,以PBS緩沖液代替一抗作為陰性對照。 4、結(jié)果判定(陽性細胞數(shù))每張切片隨機選6個視野計陽性細胞數(shù),求平均陽性細胞率。 5、統(tǒng)計學(xué)處理所有結(jié)果用平均值士標準差(x±s)表示,利用SPSS13.0統(tǒng)計學(xué)處理軟件進行正態(tài)檢驗、方差齊性檢驗,呈正態(tài)分布方差齊后,行單因素方差分析,P<0.05認為在統(tǒng)計學(xué)上有顯著差異,有顯著差異者再進行多重比較。 結(jié)果: 1、S100b在不同孕齡胎
5、盤的滋養(yǎng)層細胞、血管平滑肌細胞、肌成纖維細胞、巨噬細胞呈現(xiàn)陽性,在胎盤滋養(yǎng)層細胞的表達有隨孕齡增長而增加的趨勢。在臍帶的血管平滑肌細胞、肌纖維母細胞、羊膜上皮細胞、巨噬細胞和單核細胞染色陽性,表達的強弱在不同孕齡之間無明顯差別。 2、NSE表達于不同孕齡胎盤的滋養(yǎng)層細胞、血管平滑肌細胞、肌成纖維細胞和巨噬細胞,在臍帶的血管平滑肌細胞、肌纖維母細胞、羊膜上皮細胞、巨噬細胞和單核細胞染色陽性,不論是在胎盤還是在臍帶組織,NSE表達的
6、強弱在不同孕齡間沒有統(tǒng)計學(xué)差異。 3、GFAP在不同孕齡胎盤和臍帶組織中均未見免疫活性。 結(jié)論: 不同孕齡胎盤和臍帶均有S100b、NSE表達,其中S100b在胎盤滋養(yǎng)細胞的表達隨孕齡增加有增強的趨勢。S100b、NSE作為圍產(chǎn)兒缺血缺氧性腦損傷的標記物可能不具有特異性,因為胎盤和臍帶中均有這些物質(zhì)的釋放。GFAP在各期胎盤和臍帶中均均未見表達,推測GFAP可能更具有腦特異性,因此我們認為GFAP可能有希望成為圍
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