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1、目的:神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、S100b、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)是目前研究較多的缺血缺氧性腦損傷的標(biāo)記物,NSE特異性定位在神經(jīng)元內(nèi),GFAP、S100b主要集中在星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)。在圍產(chǎn)醫(yī)學(xué),主要通過(guò)測(cè)定羊水、臍血、新生兒血和新生兒腦脊液中這些指標(biāo)來(lái)預(yù)測(cè)圍產(chǎn)兒腦損傷,國(guó)外有研究發(fā)現(xiàn)S100b和NSE的表達(dá)不僅局限于神經(jīng)系統(tǒng),胎盤(pán)組織也有相應(yīng)表達(dá)。因此臍血和羊水中S100b和NSE的活性是來(lái)自于腦損傷還是來(lái)自于胎盤(pán)或臍帶組織
2、的釋放?人們對(duì)此提出質(zhì)疑。S100b、NSE和GFAP究竟在胎盤(pán)或臍帶組織中呈怎樣的表達(dá)?不同孕周的變化趨勢(shì)如何?國(guó)內(nèi)外均未見(jiàn)系統(tǒng)研究報(bào)道。研究通過(guò)系統(tǒng)評(píng)價(jià)30名不同孕齡的健康產(chǎn)婦胎盤(pán)和臍帶組織S100b、NSE和GFAP的免疫活性,探討哪種指標(biāo)更有希望成為圍產(chǎn)兒缺血缺氧性腦損傷的標(biāo)記物。 材料和方法: 1、試劑 NSE、S100b、GFAP一抗、免疫組化試劑盒均由邁新試劑公司提供。 2、標(biāo)本來(lái)源 組織來(lái)
3、自于30名不同孕齡健康產(chǎn)婦的胎盤(pán)和臍帶(采集標(biāo)本事先已得到患者和家屬的同意),其中28周以下的來(lái)自于10個(gè)因?yàn)樘汉湍阁w原因流產(chǎn)的產(chǎn)婦,28-36周的來(lái)自于10個(gè)早產(chǎn)的產(chǎn)婦,36周以上的來(lái)自于10名自然分娩的產(chǎn)婦。多胎妊娠、胎兒腦畸形、21三體綜合癥及感染的除外。分娩后,立刻取胎盤(pán)中心的小葉和胎兒側(cè)臍帶組織,并固定在10%多聚甲醛待檢。 3、方法 胎盤(pán)或臍帶組織S100b、NSE和GFAP的檢測(cè)用免疫組化S-P法,以邁新
4、公司提供的陽(yáng)性對(duì)照片為陽(yáng)性對(duì)照,以PBS緩沖液代替一抗作為陰性對(duì)照。 4、結(jié)果判定(陽(yáng)性細(xì)胞數(shù))每張切片隨機(jī)選6個(gè)視野計(jì)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù),求平均陽(yáng)性細(xì)胞率。 5、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有結(jié)果用平均值士標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,利用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)處理軟件進(jìn)行正態(tài)檢驗(yàn)、方差齊性檢驗(yàn),呈正態(tài)分布方差齊后,行單因素方差分析,P<0.05認(rèn)為在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著差異,有顯著差異者再進(jìn)行多重比較。 結(jié)果: 1、S100b在不同孕齡胎
5、盤(pán)的滋養(yǎng)層細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、肌成纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞呈現(xiàn)陽(yáng)性,在胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞的表達(dá)有隨孕齡增長(zhǎng)而增加的趨勢(shì)。在臍帶的血管平滑肌細(xì)胞、肌纖維母細(xì)胞、羊膜上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞染色陽(yáng)性,表達(dá)的強(qiáng)弱在不同孕齡之間無(wú)明顯差別。 2、NSE表達(dá)于不同孕齡胎盤(pán)的滋養(yǎng)層細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、肌成纖維細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,在臍帶的血管平滑肌細(xì)胞、肌纖維母細(xì)胞、羊膜上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞染色陽(yáng)性,不論是在胎盤(pán)還是在臍帶組織,NSE表達(dá)的
6、強(qiáng)弱在不同孕齡間沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 3、GFAP在不同孕齡胎盤(pán)和臍帶組織中均未見(jiàn)免疫活性。 結(jié)論: 不同孕齡胎盤(pán)和臍帶均有S100b、NSE表達(dá),其中S100b在胎盤(pán)滋養(yǎng)細(xì)胞的表達(dá)隨孕齡增加有增強(qiáng)的趨勢(shì)。S100b、NSE作為圍產(chǎn)兒缺血缺氧性腦損傷的標(biāo)記物可能不具有特異性,因?yàn)樘ケP(pán)和臍帶中均有這些物質(zhì)的釋放。GFAP在各期胎盤(pán)和臍帶中均均未見(jiàn)表達(dá),推測(cè)GFAP可能更具有腦特異性,因此我們認(rèn)為GFAP可能有希望成為圍
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